{"id":2753,"date":"2020-02-24T11:30:02","date_gmt":"2020-02-24T11:30:02","guid":{"rendered":"http:\/\/www3.uah.es\/secuah\/2020\/?p=1618"},"modified":"2020-02-24T11:30:02","modified_gmt":"2020-02-24T11:30:02","slug":"dianas-2020-9-1-e202003b08-campillo-etal-la-formacion-de-podosomas-y-la-adhesion-de-leucocitos-es-mediada-por-la-quinasa-ligada-a-integrinas-en-la-enfermedad-renal-cronica-erc","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2020-9-1-e202003b08-campillo-etal-la-formacion-de-podosomas-y-la-adhesion-de-leucocitos-es-mediada-por-la-quinasa-ligada-a-integrinas-en-la-enfermedad-renal-cronica-erc\/","title":{"rendered":"dianas 9 (1) Campillo etal 2020 La formaci\u00f3n de podosomas y la adhesi\u00f3n de leucocitos es mediada por la Quinasa Ligada a Integrinas en la enfermedad renal cr\u00f3nica (ERC)."},"content":{"rendered":"
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dianas 9(1)
<\/a> > Campillo etal
<\/a><\/p>\n\n

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003b08
<\/p>\n\n

Sof\u00eda Campillo, Lourdes Bohorquez, Elena Guti\u00e9rrez-Calabr\u00e9s, Diego Garc\u00eda- Ayuso, David Vaillo, Mercedes Griera, Sergio de Frutos, Manuel Rodr\u00edguez-Puyol, Diego Rodr\u00edguez-Puyol, Laura Calleros<\/p>\n\n

1. <\/b>Departmento de Biolog\u00eda de Sistemas, Unidad de Fisiolog\u00eda, Universidad de Alcal\u00e1 de Henares, Alcal\u00e1 de Henares, Madrid, Espa\u00f1a.
  2. <\/b>Instituto Ram\u00f3n y Cajal de Investigaciones Sanitarias (IRYCIS), Fundaci\u00f3n Renal I\u00f1igo \u00c1lvarez de Toledo (FRIAT), REDinREN del Instituto de Salud Carlos III, y NOVELREN de la Comunidad de Madrid, Madrid, Espa\u00f1a.
  3. <\/b>Fundaci\u00f3n para la Investigaci\u00f3n Biom\u00e9dica, Hospital Universitario Pr\u00edncipe de Asturias, Alcal\u00e1 de Henares, Madrid, Espa\u00f1a.
  4. <\/b>Unidad de Nefrolog\u00eda del Hospital Universitario Pr\u00edncipe de Asturias y Departamento de Medicina de la Universidad de Alcal\u00e1 de Henares, Alcal\u00e1 de Henares, Madrid, Espa\u00f1a.
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a<\/b>
. <\/b>sofia.campillo@edu.uah.es  b<\/b>
. <\/b>lourdes.bohorquez@uah.es  c<\/b>
. <\/b>elena.gutierrez@edu.uah.es  d<\/b>
. <\/b>diegogarcia2195@gmail.com  e<\/b>
. <\/b>david.vaillo@uah.es  f<\/b>
. <\/b>mercedes.griera@uah.es  g<\/b>
. <\/b>sergio.frutos@uah.es  h<\/b>
. <\/b>manuel.rodriguez@uah.es  i<\/b>
. <\/b>drodriguez.hupa@gmail.com  j<\/b>
. <\/b>laura.calleros@uah.es<\/p>\n\n

V Congreso de Se\u00f1alizaci\u00f3n Celular, SECUAH 2020.

\n16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcal\u00e1. Alcal\u00e1 de Henares, Madrid. Espa\u00f1a.
<\/p>\n\n

Resumen<\/p>\n

Los pacientes con ERC tienen un mayor riesgo de desarrollar enfermedades cardiovasculares. Las toxinas ur\u00e9micas unidas a prote\u00ednas, como el p<\/em>-cresol (pc) y el indoxil sulfato (IS), no se pueden eliminar mediante los m\u00e9todos de hemodi\u00e1lisis convencional y producen disfunci\u00f3n endotelial induciendo la adhesi\u00f3n y extravasaci\u00f3n de leucocitos al endotelio. Dichos procesos pueden llevarse a cabo mediante estructuras de adhesi\u00f3n din\u00e1micas denominadas podosomas. La quinasa ligada a la integrina (ILK) vincula los receptores de adhesi\u00f3n celular, las integrinas y los factores de crecimiento con el citoesqueleto de actina y con diferentes v\u00edas de se\u00f1alizaci\u00f3n. El objetivo de este estudio fue investigar la implicaci\u00f3n de ILK en la formaci\u00f3n de podosomas y la adhesi\u00f3n de leucocitos en condiciones ur\u00e9micas que simulan la ERC. Los experimentos in vitro<\/em> se realizaron en la l\u00ednea celular humana de monocitos, THP-1. Las c\u00e9lulas fueron incubadas con IS (25 y 100 \u03bcg ml-1<\/sup>) y pc (10 y 100 \u03bcg ml-1<\/sup>) en diferentes tiempos. Se determinaron la viabilidad celular, los niveles de expresi\u00f3n de ILK por Western Blot y RT-qPCR y su actividad quinasa, mediante niveles de fosforilaci\u00f3n de P-GSK-3\u03b2 (Ser9) por Western Blot. Adem\u00e1s, ILK fue delecionada con un siRNA espec\u00edfico para analizar la formaci\u00f3n de podosomas y la adhesi\u00f3n celular a una matriz de fibronectina, la transmigraci\u00f3n de los monocitos y la degradaci\u00f3n de la matriz extracelular. Tambi\u00e9n se estudi\u00f3 la colocalizaci\u00f3n de ILK con cortactina, prote\u00edna espec\u00edfica de podosomas. Observamos que las toxinas ur\u00e9micas no inducen toxicidad en las c\u00e9lulas THP-1. La actividad de ILK aument\u00f3 con el tratamiento de toxinas ur\u00e9micas a bajas y altas concentraciones, sin cambios en su expresi\u00f3n proteica. La adhesi\u00f3n de los monocitos, la formaci\u00f3n de podosomas, la transmigraci\u00f3n celular y la degradaci\u00f3n de la matriz extracelular fueron significativamente mayores con el tratamiento con toxinas a dosis bajas y altas, mientras que este aumento no se observ\u00f3 con la deleci\u00f3n de ILK. La colocalizaci\u00f3n de ILK con cortactina confirm\u00f3 la implicaci\u00f3n de ILK en la estructura de los podosomas. Para los experimentos ex vivo<\/em>, se inyect\u00f3 tamoxifeno (ratones cKD-ILK) o veh\u00edculo (ratones WT) a ratones CRE-LOX, para conseguir la deleci\u00f3n de ILK. Se aislaron las c\u00e9lulas mononucleares de sangre perif\u00e9rica (CMSP) de los ratones, se trataron con toxinas ur\u00e9micas y se analiz\u00f3 la adhesi\u00f3n celular a una matriz de fibronectina. En las CMSP de los ratones cKD-ILK se observ\u00f3 una menor adhesi\u00f3n celular, en comparaci\u00f3n con los ratones WT, y las toxinas ur\u00e9micas indujeron un aumento significativo de la adhesi\u00f3n de las CMSP, que fue significativamente menor en las CMSP de los ratones cKD-ILK. Estos datos sugieren que ILK desempe\u00f1a un papel cr\u00edtico en los procesos requeridos para la extravasaci\u00f3n de leucocitos inducido por la acumulaci\u00f3n de las toxinas ur\u00e9micas y que podr\u00eda ser una diana terap\u00e9utica potencial para el tratamiento del da\u00f1o vascular asociado con la ERC.
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\n<\/div>\n\n<\/div>\n\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[5,52,18,53,55,2],"tags":[],"class_list":["post-2753","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-article","category-dianas-vol-9-num-1","category-fisiologia","category-secuah-2020","category-sesion-b","category-vols-1-9"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/2753","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=2753"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/2753\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=2753"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=2753"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=2753"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}