{"id":3003,"date":"2016-03-01T00:00:00","date_gmt":"2016-03-01T00:00:00","guid":{"rendered":"http:\/\/www3.uah.es\/dianas\/journal\/?p=3003"},"modified":"2016-03-01T00:00:00","modified_gmt":"2016-03-01T00:00:00","slug":"dianas-2016-5-1-e20160315-jimenez-mora-etal-v600ebraf-regula-el-flujo-autofagico-en-celulas-tumorales-tiroideas","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-1-e20160315-jimenez-mora-etal-v600ebraf-regula-el-flujo-autofagico-en-celulas-tumorales-tiroideas\/","title":{"rendered":"dianas 5 (1) Jim\u00e9nez-Mora etal 2016 V600EBRAF regula el flujo autof\u00e1gico en c\u00e9lulas tumorales tiroideas."},"content":{"rendered":"<div class='ad_single_article'>\n<p class='ad_single_article_SO'><a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-5-1\/#dianas-2016-5-1-e20160315-jimenez-mora-etal-v600ebraf-regula-el-flujo-autofagico-en-celulas-tumorales-tiroideas'>dianas 5(1)<br \/><\/a> &gt; <a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-1-e20160315-jimenez-mora-etal-v600ebraf-regula-el-flujo-autofagico-en-celulas-tumorales-tiroideas\/'>Jim\u00e9nez-Mora etal<br \/><\/a><\/p>\n\n<p class='signature'>dianas | Vol 5 Num 1 | marzo  2016 | e20160315<br \/><\/p>\n\n<p class='w_title ad_single_article_title'><sup>V600E<\/sup>BRAF regula el flujo autof\u00e1gico en c\u00e9lulas tumorales tiroideas.<br \/><\/p>\n\n<p class='w_authors ad_single_article_authors'>Eva&nbsp;Mar\u00eda&nbsp;Jim\u00e9nez&nbsp;Mora<br&nbsp;\/>, Beatriz&nbsp;Gallego&nbsp;Tamayo<br&nbsp;\/>, Antonio&nbsp;Chiloeches&nbsp;G\u00e1lvez<br&nbsp;\/><\/p>\n\n<p class='w_address ad_single_article_address'>Departamento de Biolog\u00eda de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcal\u00e1, 28871, Madrid.<br \/><\/p>\n\n<p class='w_mail ad_single_article_mail'>evajmora@yahoo.es<br \/><\/p>\n\n<p class='w_meeting ad_single_article_meeting'>I Congreso de Se\u00f1alizaci\u00f3n Celular, SECUAH 2016<br \/><br \/>\nDepartamento de Biolog\u00eda de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcal\u00e1 (UAH). Alcal\u00e1 de Henares, Madrid (Spain)<br \/><\/p>\n\n<p class='w_abstract_caption ad_single_article_abstract_caption'>Resumen<\/p>\n<p class='w_abstract ad_single_article_abstract'>La mutaci\u00f3n en el gen de BRAF que codifica para la prote\u00edna <sup>V600E<\/sup>BRAF es una de las alteraciones m\u00e1s comunes en c\u00e1ncer papilar de tiroides (PTC) [1]. Son muchos los estudios que demuestran que esta mutaci\u00f3n aparece en los PTCs m\u00e1s invasivos, agresivos y con mayor capacidad para metastatizar. Tambi\u00e9n se ha demostrado una asociaci\u00f3n significativa de esta mutaci\u00f3n con la progresi\u00f3n cl\u00ednica, recurrencia y fallo en el tratamiento de los PTCs [2]. La autofagia es un proceso por el cual la c\u00e9lula recicla mol\u00e9culas y org\u00e1nulos da\u00f1ados secuestr\u00e1ndolos en ves\u00edculas de doble membrana (autofagosomas) y transport\u00e1ndolos para su degradaci\u00f3n por fusi\u00f3n con los lisosomas (autofagolisosoma). El aumento de la autofagia puede ser debido a varias causas, entre las que se encuentran la activaci\u00f3n de la quinasa AMPK y la inhibici\u00f3n de la quinasa mTOR. Este proceso es importante en la patog\u00e9nesis de diversas enfermedades, incluido el c\u00e1ncer. Existen datos que indican que la autofagia est\u00e1 implicada en la iniciaci\u00f3n y progresi\u00f3n de c\u00e1ncer de tiroides, as\u00ed como, en la resistencia a la terapia, por lo que podr\u00eda ser utilizada para aplicaciones terap\u00e9uticas [3]. Sin embargo, se sabe muy poco sobre el papel que juega la mutaci\u00f3n <sup>V600E<\/sup>BRAF en el proceso de autofagia y su relaci\u00f3n con la progresi\u00f3n de PTCs. El objetivo de este trabajo es estudiar la implicaci\u00f3n de esta mutaci\u00f3n en la autofagia. Para ello, se han empleado las c\u00e9lulas de c\u00e1ncer de tiroides 8505C, que poseen la forma oncog\u00e9nica <sup>V600E<\/sup>BRAF , y WRO, que contienen la forma silvestre de esta prote\u00edna, en las que se han estudiado los niveles de los marcadores autof\u00e1gicos, p62 y LC3, mediante western blot, as\u00ed como la localizaci\u00f3n de este \u00faltimo en autofagosomas o autofagolisosomas, mediante detecci\u00f3n de fluorescencia con microscop\u00eda confocal. Adem\u00e1s, para comprobar la posible implicaci\u00f3n de <sup>V600E<\/sup>BRAF en la autofagia mediada por mTOR y AMPK, se estimaron los niveles de fosforilaci\u00f3n de dichas prote\u00ednas y de sus sustratos, prote\u00ednas S6 y ACC, respectivamente, en ambas l\u00edneas. Los resultados obtenidos muestran como, tanto la inhibici\u00f3n de BRAF con el inhibidor PLX 4720, como la eliminaci\u00f3n de su expresi\u00f3n mediante siRNA, modifican los niveles de las prote\u00ednas p62 y de LC3, marcadores de la autofagia, as\u00ed como la actividad de mTOR y un aumento de actividad de AMPK. Estos datos se corroboran con la sobreexpresi\u00f3n de <sup>V600E<\/sup>BRAF en las c\u00e9lulas WRO, en las que los niveles de p62 y LC3, la actividad de mTOR y la de AMPK, es contraria a la observada cuando se inhibe <sup>V600E<\/sup>BRAF . Nuestros resultados indican que <sup>V600E<\/sup>BRAF regula los niveles de los marcadores autof\u00e1gicos LC3 y p62 en las l\u00edneas 8505C y WRO, y que el efecto que tiene sobre la autofagia parece independiente del producido por mTOR y AMPK. Todo esto sugiere que el oncog\u00e9n BRAF podr\u00eda ejercer alguna de sus funciones protumorales a trav\u00e9s de la modulaci\u00f3n de la autofagia celular.<\/p><\/p>\n\n<div class='ad_single_article_citation_box'>\n<\/div>\n\n<\/div>\n\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[5,35,2],"tags":[],"class_list":["post-3003","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-article","category-dianas-vol-5-num-1","category-vols-1-9"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3003","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=3003"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3003\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3003"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=3003"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=3003"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}