{"id":3211,"date":"2020-06-13T18:32:37","date_gmt":"2020-06-13T16:32:37","guid":{"rendered":"http:\/\/www3.uah.es\/dianas\/journal\/dianas-2016-5-1-article-title-3068-copy-6\/"},"modified":"2020-06-13T18:32:37","modified_gmt":"2020-06-13T16:32:37","slug":"dianas-2016-5-1-e20160352-sosa-callejas-etal-papel-de-la-hiperfosfatemia-en-la-sarcopenia-homeostasis-proteica-y-senescencia","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-1-e20160352-sosa-callejas-etal-papel-de-la-hiperfosfatemia-en-la-sarcopenia-homeostasis-proteica-y-senescencia\/","title":{"rendered":"dianas 5 (1) Sosa-Callejas etal 2016 Papel de la hiperfosfatemia en la sarcopenia: Homeostasis proteica y senescencia."},"content":{"rendered":"<div class='ad_single_article'>\n<p class='ad_single_article_SO'><a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-5-1\/#dianas-2016-5-1-e20160352-sosa-callejas-etal-papel-de-la-hiperfosfatemia-en-la-sarcopenia-homeostasis-proteica-y-senescencia'>dianas 5(1)<br \/><\/a> &gt; <a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-1-e20160352-sosa-callejas-etal-papel-de-la-hiperfosfatemia-en-la-sarcopenia-homeostasis-proteica-y-senescencia\/'>Sosa-Callejas etal<br \/><\/a><\/p>\n\n<p class='signature'>dianas | Vol 5 Num 1 | marzo  2016 | e20160352<br \/><\/p>\n\n<p class='w_authors ad_single_article_authors'>Patricia&nbsp;Sosa&nbsp;Callejas<br&nbsp;\/>, Nuria&nbsp;Troyano<br&nbsp;\/>, In\u00e9s&nbsp;Mora<br&nbsp;\/>, Diana&nbsp;Medrano<br&nbsp;\/>, Patricia&nbsp;Plaza<br&nbsp;\/>, Mercedes&nbsp;Griera<br&nbsp;\/>, Marco&nbsp;Hatem<br&nbsp;\/>, Gemma&nbsp;Olmos<br&nbsp;\/>, Susana&nbsp;L\u00f3pez<br&nbsp;\/>, Mar\u00eda&nbsp;Piedad&nbsp;Ruiz-Torres<br&nbsp;\/><\/p>\n\n<p class='w_address ad_single_article_address'><b>1.&nbsp;<\/b>Departamento de Biolog\u00eda de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud. Universidad de Alcal\u00e1 and Unidad de investigaci\u00f3n.<br \/>&nbsp; <b>2.&nbsp;<\/b>RedinRen, Instituto de Salud Carlos III. Madrid. Spain.<br \/>&nbsp; <b>3.&nbsp;<\/b>Fundaci\u00f3n para la Investigaci\u00f3n Biom\u00e9dica, Hospital Pr\u00edncipe de Asturias. Alcal\u00e1 de Henares.<br \/><\/p>\n\n<p class='w_mail ad_single_article_mail'>patricia.sosacalle@gmail.com<br \/><\/p>\n\n<p class='w_meeting ad_single_article_meeting'>I Congreso de Se\u00f1alizaci\u00f3n Celular, SECUAH 2016<br \/><br \/>\nDepartamento de Biolog\u00eda de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcal\u00e1 (UAH). Alcal\u00e1 de Henares, Madrid (Spain)<br \/><\/p>\n\n<p class='w_abstract_caption ad_single_article_abstract_caption'>Resumen<\/p>\n<p class='w_abstract ad_single_article_abstract'>INTRODUCCI\u00d3N. Se ha descrito un aumento en la concentraci\u00f3n s\u00e9rica de fosfato en la enfermedad renal cr\u00f3nica y en el envejecimiento. Una patolog\u00eda asociada en ambos casos es la sarcopenia, caracterizada por la p\u00e9rdida de masa y fuerza muscular, que puede ser debida, en parte, a la p\u00e9rdida de la capacidad regenerativa en el m\u00fasculo. El objetivo del trabajo fue estudiar si la hiperfosfatemia induce la p\u00e9rdida de la capacidad regenerativa muscular debido al aumento de la senescencia de los mioblastos y los mecanismos implicados en este fen\u00f3meno. MATERIALES Y M\u00c9TODOS. Se utilizaron mioblastos C2C12 de rat\u00f3n en cultivo. Las c\u00e9lulas fueron tratadas con 10 mM de \u03b2-glicerofosfato (BGP) durante 24, 48 o 72 horas como donador de f\u00f3sforo extracelular. Se analiz\u00f3 la expresi\u00f3n de genes de senescencia como p16, p21 y p53 mediante western blot. El porcentaje de c\u00e9lulas senescentes identificado por la actividad de \u03b2-galactosidasa asociada a la senescencia, fue analizado por microscopia confocal utilizando el substrato, 5-dodecanoylaminofluoresceina di-beta-D-galactopyranosido. Para demostrar una relaci\u00f3n directa entre hiperfosfatemia y senescencia se utiliz\u00f3 \u00e1cido fosfonof\u00f3rmico, inhibidor del transportador Na-Pi. Se estudi\u00f3 el efecto del BGP sobre los distintos sistemas de degradaci\u00f3n proteica, midiendo la actividad del proteosoma, mediante el uso de un sustrato fluorog\u00e9nico espec\u00edfico, y la autofagia, analizando los niveles de expresi\u00f3n de p62 y LC3I respecto a LC3II, mediante western blot. La actividad total de calpainas, mediante el uso de un sustrato fluorog\u00e9nico espec\u00edfico y la expresi\u00f3n de calpainas 1, 2 y 3 analizada por western blot. Para establecer si el efecto sobre los sistemas de degradaci\u00f3n proteica fue responsable de la senescencia inducida por BGP se midi\u00f3 est\u00e1 en presencia de 1uM calpeptina, inhibidor de calpainas, y 50nM de rapamicina, activador de la autofagia.  RESULTADOS. BGP increment\u00f3 la expresi\u00f3n de p53, as\u00ed como el porcentaje de c\u00e9lulas senescentes. El uso del \u00e1cido fosfonof\u00f3rmico suprimi\u00f3 este incremento durante el tratamiento con BGP, lo que indica que la senescencia fue dependiente del aumento de BGP. Se observ\u00f3 que el BGP induce una disminuci\u00f3n de la actividad del proteosoma y un aumento de p62 y LC3I\/LC3II, lo que se corresponde con una disminuci\u00f3n de la autofagia. Respecto a la actividad total y la expresi\u00f3n de calpainas 1, 2 y 3 el BGP induce un incremento en ambos valores.  La adici\u00f3n de calpeptina inhibi\u00f3 el aumento en p53, lo que indica que la v\u00eda de las calpainas est\u00e1 relacionada con el efecto senescente del BGP. Cuando se procedi\u00f3 a la activaci\u00f3n de la autofagia con rapamicina se comprob\u00f3 que no se produc\u00edan los aumentos de genes senescentes con BGP, indicando que la autofagia jug\u00f3 un papel central en la inducci\u00f3n de la senescencia. CONCLUSI\u00d3N. El aumento en la concentraci\u00f3n de f\u00f3sforo extracelular induce senescencia en los mioblastos de musculo esquel\u00e9tico, estas c\u00e9lulas muestran un incremento en la actividad de calpaina y una disminuci\u00f3n de la actividad proteol\u00edtica del proteosoma y la autofagia. Esta alteraci\u00f3n en la homeostasis de prote\u00ednas est\u00e1 implicada en la inducci\u00f3n de senescencia en los mioblastos y este podr\u00eda ser un mecanismo involucrado en la progresi\u00f3n de la sarcopenia ligada a envejecimiento o enfermedad renal cr\u00f3nica.<\/p><\/p>\n\n<div class='ad_single_article_citation_box'>\n<\/div>\n\n<\/div>\n\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[5,35,2],"tags":[],"class_list":["post-3211","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-article","category-dianas-vol-5-num-1","category-vols-1-9"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3211","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=3211"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3211\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3211"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=3211"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=3211"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}