{"id":3310,"date":"2020-06-14T18:26:19","date_gmt":"2020-06-14T16:26:19","guid":{"rendered":"http:\/\/www3.uah.es\/dianas\/journal\/dianas-2016-5-1-article-title-3213-copy\/"},"modified":"2020-06-14T18:26:19","modified_gmt":"2020-06-14T16:26:19","slug":"dianas-2016-5-1-e20160355-gonzalez-corpas-etal-shp-1-controla-la-expresion-genica-mediante-la-regulacion-de-las-modificaciones-epigeneticas","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-1-e20160355-gonzalez-corpas-etal-shp-1-controla-la-expresion-genica-mediante-la-regulacion-de-las-modificaciones-epigeneticas\/","title":{"rendered":"dianas 5 (1) Gonz\u00e1lez-Corpas etal 2016 SHP-1 controla la expresi\u00f3n g\u00e9nica mediante la regulaci\u00f3n de las modificaciones epigen\u00e9ticas."},"content":{"rendered":"<div class='ad_single_article'>\n<p class='ad_single_article_SO'><a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-5-1\/#dianas-2016-5-1-e20160355-gonzalez-corpas-etal-shp-1-controla-la-expresion-genica-mediante-la-regulacion-de-las-modificaciones-epigeneticas'>dianas 5(1)<br \/><\/a> &gt; <a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-1-e20160355-gonzalez-corpas-etal-shp-1-controla-la-expresion-genica-mediante-la-regulacion-de-las-modificaciones-epigeneticas\/'>Gonz\u00e1lez-Corpas etal<br \/><\/a><\/p>\n\n<p class='signature'>dianas | Vol 5 Num 1 | marzo  2016 | e20160355<br \/><\/p>\n\n<p class='w_authors ad_single_article_authors'>Ana&nbsp;Gonz\u00e1lez&nbsp;Corpas<br&nbsp;\/>, Mar\u00eda&nbsp;Jes\u00fas&nbsp;Orea&nbsp;Mart\u00ednez<br&nbsp;\/>, Bego\u00f1a&nbsp;Col\u00e1s<br&nbsp;\/>, Santiago&nbsp;Ropero<br&nbsp;\/><\/p>\n\n<p class='w_address ad_single_article_address'>Unidad de Bioqu\u00edmica y Biolog\u00eda Molecular, Departamento de Biolog\u00eda de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcal\u00e1, 28871 Alcal\u00e1 de Henares, Madrid, Espa\u00f1a.<br \/><\/p>\n\n<p class='w_mail ad_single_article_mail'><b><b>a<\/b><br \/>.&nbsp;<\/b>agcorpas@gmail.com<br&nbsp;\/>&nbsp; <b><b>b<\/b><br \/>.&nbsp;<\/b>oreamariajesus@gmail.com<br&nbsp;\/><\/p>\n\n<p class='w_meeting ad_single_article_meeting'>I Congreso de Se\u00f1alizaci\u00f3n Celular, SECUAH 2016<br \/><br \/>\nDepartamento de Biolog\u00eda de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcal\u00e1 (UAH). Alcal\u00e1 de Henares, Madrid (Spain)<br \/><\/p>\n\n<p class='w_abstract_caption ad_single_article_abstract_caption'>Resumen<\/p>\n<p class='w_abstract ad_single_article_abstract'>SHP1 es una fosfotirosina fosfatasa (PTP) que se expresa principalmente en c\u00e9lulas hematopoy\u00e9ticas [1] aunque tambi\u00e9n se ha descrito su presencia en tejidos s\u00f3lidos como la pr\u00f3stata. Aunque esta prote\u00edna tiene una localizaci\u00f3n fundamentalmente citos\u00f3lica, nuestro grupo ha demostrado que en l\u00edneas celulares de c\u00e1ncer de pr\u00f3stata tambi\u00e9n est\u00e1 presente en el n\u00facleo [2], y que aqu\u00ed podr\u00eda controlar la expresi\u00f3n g\u00e9nica. Una de las funciones de las modificaciones epigen\u00e9ticas es la regulaci\u00f3n de la expresi\u00f3n g\u00e9nica. Las modificaciones epigen\u00e9ticas mejor conocidas son la metilaci\u00f3n del DNA y las modificaciones post-traduccionales de las histonas. En este trabajo nos propusimos determinar si SHP-1 regula la expresi\u00f3n g\u00e9nica mediante cambios en la metilaci\u00f3n del DNA. Para ello, determinamos el estado de metilaci\u00f3n de 1507 CpGs correspondientes a 807 genes en las l\u00edneas celulares de c\u00e1ncer de pr\u00f3stata LNCaP y PC3 en las que se anul\u00f3 la expresi\u00f3n de SHP1 mediante siRNA. De estos ensayos seleccionamos un grupo de genes en los que la ausencia de SHP1 provoca  una disminuci\u00f3n de los niveles de metilaci\u00f3n, concretamente GSTP1, RUNX1T1, NPY, HIN-1 y KIT. Dado que la metilaci\u00f3n del DNA en la regi\u00f3n promotora de los genes es una marca epigen\u00e9tica que se relaciona con la p\u00e9rdida de  expresi\u00f3n [3], a continuaci\u00f3n se determinaron los niveles de mRNA de los genes seleccionados mediante qRT-PCR y observamos que la perdida de metilaci\u00f3n se correlacion\u00f3 con un aumento en la expresi\u00f3n. El tratamiento de las c\u00e9lulas LNCaP con el agente desmetilante 5-aza-2-deoxicitidina confirm\u00f3 que los cambios en la expresi\u00f3n observados se deben a cambios en la metilaci\u00f3n ya que produjo un aumento en la expresi\u00f3n de los genes seleccionados. Adem\u00e1s, el tratamiento de las c\u00e9lulas LNCaP con SAHA, un inhibidor de histonas desacetilasas, provoc\u00f3 un aumento de la expresi\u00f3n de dichos genes. Todas las modificaciones epigen\u00e9ticas cooperan en la regulaci\u00f3n de la expresi\u00f3n, y en concreto la metilaci\u00f3n del DNA va asociada con la p\u00e9rdida de acetilaci\u00f3n de las histonas en el promotor de los genes que no se expresan [4], por lo que a continuaci\u00f3n determinamos el estado de acetilaci\u00f3n de las histonas en los promotores de los genes seleccionados y observamos que el aumento en la expresi\u00f3n se correlaciona con una mayor acetilaci\u00f3n de las histonas en la regi\u00f3n promotora de estos genes. A la vista de estos resultados nos planteamos si SHP1 podr\u00eda esta interaccionando con prote\u00ednas que regulan las modificaciones epigen\u00e9ticas, especialmente, prote\u00ednas encargadas de mantener la metilaci\u00f3n del DNA y el estado de acetilaci\u00f3n de las histonas y de esta manera estar influyendo en la expresi\u00f3n g\u00e9nica. Para ello realizamos ensayos de \u201cPull Down\u201d (PD) y observamos una interacci\u00f3n entre SHP1 y HDAC2, prote\u00edna encargada de la desacetilaci\u00f3n de histonas [5]. Para comprobar si lo observado mediante PD se reproduc\u00eda en un ensayo in vivo se realizar\u00f3n ensayos de coinmunoprecipitaci\u00f3n (IP)  con los que se confirm\u00f3 lo que ya hab\u00edamos observado mediante PD. En conclusi\u00f3n, nuestros datos indican que en l\u00edneas celulares de c\u00e1ncer de pr\u00f3stata SHP1 podr\u00eda regular la expresi\u00f3n de genes con importantes funciones en el mantenimiento de la homeostasis celular mediante el control de las modificaciones epigen\u00e9ticas. Este efecto podr\u00eda estar mediado por su interacci\u00f3n con HDAC2 que estar\u00eda provocando cambios en la acetilaci\u00f3n de las histonas en el promotor de los genes seleccionados y por tanto ser\u00eda el responsable de los cambios en la metilaci\u00f3n observados.<\/p><\/p>\n\n<div class='ad_single_article_citation_box'>\n<\/div>\n\n<\/div>\n\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[5,35,2],"tags":[],"class_list":["post-3310","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-article","category-dianas-vol-5-num-1","category-vols-1-9"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3310","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=3310"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3310\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3310"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=3310"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=3310"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}