{"id":431,"date":"2016-09-01T00:00:00","date_gmt":"2016-09-01T00:00:00","guid":{"rendered":"http:\/\/www3.uah.es\/dianas\/journal\/index.php\/2017\/02\/12\/dianas-5-2-2-copy-8\/"},"modified":"2016-09-01T00:00:00","modified_gmt":"2016-09-01T00:00:00","slug":"dianas-2016-5-2-e20160907-garcia-soriano-etal-puesta-a-punto-de-ensayos-de-cuantificacion-de-dimerizacion-y-actividad-de-la-superoxido-dismutasa-de-hierro-a-de-leishmania-infantum","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-2-e20160907-garcia-soriano-etal-puesta-a-punto-de-ensayos-de-cuantificacion-de-dimerizacion-y-actividad-de-la-superoxido-dismutasa-de-hierro-a-de-leishmania-infantum\/","title":{"rendered":"Dianas 5 (2) Garc\u00eda-Soriano etal 2016 Puesta a punto de ensayos de cuantificaci\u00f3n de dimerizaci\u00f3n y actividad de la super\u00f3xido dismutasa de hierro A de Leishmania infantum."},"content":{"rendered":"<div class='ad_single_article'>\n<p class='ad_single_article_SO'><a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-5-2\/#dianas-2016-5-2-e20160907-garcia-soriano-etal-puesta-a-punto-de-ensayos-de-cuantificacion-de-dimerizacion-y-actividad-de-la-superoxido-dismutasa-de-hierro-a-de-leishmania-infantum'>Dianas 5(2)<br \/><\/a> &gt; <a href='https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/dianas-2016-5-2-e20160907-garcia-soriano-etal-puesta-a-punto-de-ensayos-de-cuantificacion-de-dimerizacion-y-actividad-de-la-superoxido-dismutasa-de-hierro-a-de-leishmania-infantum\/'>Garc\u00eda-Soriano etal<br \/><\/a><\/p>\n\n<p class='signature'>Dianas | Vol 5 Num 2 | septiembre  2016 | e20160907<br \/><\/p>\n\n<p class='w_title ad_single_article_title'>Puesta a punto de ensayos de cuantificaci\u00f3n de dimerizaci\u00f3n y actividad de la super\u00f3xido dismutasa de hierro A de <em>Leishmania infantum<\/em><br \/><\/p>\n\n<p class='w_authors ad_single_article_authors'>Juan&nbsp;Carlos&nbsp;Garc\u00eda&nbsp;Soriano<br&nbsp;\/>, H\u00e9ctor&nbsp;Elessar&nbsp;de&nbsp;Lucio&nbsp;Ortega<br&nbsp;\/>, Antonio&nbsp;Jim\u00e9nez&nbsp;Ru\u00edz<br&nbsp;\/><\/p>\n\n<p class='w_address ad_single_article_address'>Unidad de Bioqu\u00edmica y Biolog\u00eda Molecular, Departamento de Biolog\u00eda de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcal\u00e1, 28871 Alcal\u00e1 de Henares, Madrid, Espa\u00f1a.<br \/><\/p>\n\n<p class='w_mail ad_single_article_mail'>antonio.jimenez@uah.es<br \/><\/p>\n\n<p class='w_abstract_caption ad_single_article_abstract_caption'>Resumen<\/p>\n<p class='w_abstract ad_single_article_abstract'>Los par\u00e1sitos del g\u00e9nero<em> Leishmania<\/em> son los agentes causales de la leishmaniasis. Estos par\u00e1sitos tienen la capacidad de sobrevivir dentro de las vacuolas fagoc\u00edticas de los macr\u00f3fagos a pesar de las condiciones de pH y estr\u00e9s oxidativo all\u00ed generadas. Esta resistencia se debe a diversos mecanismos biol\u00f3gicos que comprenden enzimas de detoxificaci\u00f3n de las especies reactivas de ox\u00edgeno, entre otras. Estas enzimas son potenciales dianas terap\u00e9uticas para el tratamiento de la leishmaniasis. Una de estas enzimas es la super\u00f3xido dismutasa que cataliza la dismutaci\u00f3n del ani\u00f3n super\u00f3xido, una especie reactiva de ox\u00edgeno con capacidad de originar otras especies reactivas m\u00e1s t\u00f3xicas. <em>Leishmania<\/em> cuenta con 4 super\u00f3xido dismutasas de hierro. La super\u00f3xido dismutasa de hierro A (Fe-SODA) se localiza en la mitocondria, lugar de producci\u00f3n end\u00f3gena de super\u00f3xido. Se ha visto que la Fe-SODA se sobrexpresa en las formas parasitarias que infectan los macr\u00f3fagos y que protege de la muerte celular inducida por el tratamiento con miltefosina. En este trabajo se ha clonado, expresado y purificado la Fe-SODA de <em>Leishmania infantum<\/em> con dos \u201c<em>etiquetas\u201d<\/em> (tags) moleculares distintas que permiten generar una versi\u00f3n heterodim\u00e9rica para la puesta a punto de dos ensayos que permitan evaluar la eficacia de compuestos dirigidos contra la enzima. Uno de los ensayos que se ha optimizado en este trabajo ha sido un ensayo de cuantificaci\u00f3n de la dimerizaci\u00f3n basado en la t\u00e9cnica ELISA usando anticuerpos contra las dos etiquetas del heterod\u00edmero, uno para pegar a la placa y el otro para evaluar el porcentaje de enzima dim\u00e9rica. El segundo ensayo est\u00e1 dirigido a medir la actividad catal\u00edtica de la enzima. El ensayo de actividad se basa en la producci\u00f3n de super\u00f3xido por el sistema xantina\/xantina oxidasa y en la competencia por el super\u00f3xido entre la Fe-SODA y el citocromo c, una prote\u00edna que cambia de color al reducirse por el super\u00f3xido.<br \/><\/p>\n\n<div class='ad_single_article_citation_box'>\n<\/div>\n\n<\/div>\n\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[5,36,2],"tags":[],"class_list":["post-431","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-article","category-dianas-vol-5-num-2","category-vols-1-9"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/431","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=431"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/431\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=431"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=431"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/dianas.web.uah.es\/journal\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=431"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}