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dianas | Vol 13 Num 1 | marzo 2024 | e202403x031

El silenciamiento de la DNA polimerasa theta como método de resensibilización de células colorrectales resistantes a PLK1.

Yuliia Fatych^a, Carolina Guerrero-Amelín^b, Laura del Puerto Nevado, Pedro Antonio Mateos Gómez

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular. Departamento de Biología de Sistemas. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid, España.

a. yuliia.fatych@uah.es  b. carolina.guerreroa@uah.es

IX Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2024.
XVIII Simposio de Dianas Terapéuticas.
18 a 22 de marzo, 2024. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: resistencias; cáncer colorrectal; reparación DNA, polimerasa theta

Resumen

El cáncer colorrectal ocupa el segundo lugar en mortalidad a nivel mundial. Suele originarse a partir unas formaciones celulares en el colon, los pólipos. Aunque la mayoría de ellos son benignos, algunos pueden volverse malignos con el tiempo. Se han explorado inhibidores de PLK1 en ensayos clínicos, pero la rápida aparición de resistencias los ha limitado como opción terapéutica. Estudiamos si las células sensibles y resistentes a estos inhibidores, como el BI2536, reducen su viabilidad en ausencia de la DNA Polimerasa Theta (PolQ). PolQ está sobreexpresada en células tumorales, contrarrestando el estrés replicativo y la inestabilidad genómica mediante la reparación del DNA. Se cultivaron células HCT116 sensibles y resistentes al BI2536, y se infectaron con lentivirus PLKO.1_shControl y PLKO.1_shPolQ, lo que permitió silenciar PolQ. La expresión de PolQ fue del 14% y 11% en células sensibles y resistentes, respectivamente. Para estudiar el efecto del silenciamiento se usaron ensayos de viabilidad celular (MTT) y ensayos de formación de colonias. En ambos, la línea resistente siempre se cultivó con BI2536. La línea sensible recibió su dosis IC50 3 días antes del MTT. El silenciamiento de PolQ redujo la proliferación celular de las células HCT116, tanto sensibles como resistentes al inhibidor. Aunque no se resensibilizaron las células resistentes, la combinación de BI2536 y silenciamiento de PolQ en las células sensibles redujo más la proliferación que cada tratamiento por separado.