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dianas | Vol 15 Num 1 | marzo 2026 | e202603fp005

Selección y caracterización de aptámeros de DNA frente a la IgG de ratón.

Cristina Coscolín^1, a, Alfonso Esteban-Lasso¹, Lucia Real¹, Alejandro García-Nafría¹, Cristina Martínez-Toledo¹, Leire Fernández-Crippa², Ignacio Antona-Palacios², Elena Vuelta², Ignacio Garcia-Tuñon^2, 3, Miguel Ángel Ortega^3, 4, Mar Royuela^2, 3, M Val Toledo-Lobo², José Casas-Martín¹

1. Inari Biotech SL.  2. Dpto. Biomedicina y Biotecnología UAH.  3. IRICYS grupo de Ingeniería Tisular y Medicina Regenerativa.  4. Dpto. Medicina y Especialidades Médicas UAH.

a. inaribiotech@gmail.com

XI Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2026.
XX Simposio de Dianas Terapéuticas.
16 a 18 de marzo, 2026. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: aptámeros; SELEX; IgG murina; NGS; G-cuádruplex

Resumen

Las inmunoglobulinas son dianas de gran interés para el desarrollo de aptámeros por sus múltiples aplicaciones diagnósticas y terapéuticas, pero la obtención de ligandos frente a IgG con alta afinidad y especificidad sigue siendo un reto. En este trabajo se abordó la selección de aptámeros de ADN frente a IgG de ratón mediante una estrategia SELEX optimizada. Para ello, se empleó una mezcla de IgG murinas nativas (IgG1, IgG2a e IgG2b) inmovilizadas en partículas magnéticas carboxiladas, con contraselección frente a otras IgG y fragmentos F(ab’)2, y un esquema de selección con condiciones progresivamente más estrictas. El seguimiento por qPCR y curvas de melting mostró una disminución de la heterogeneidad poblacional y un desplazamiento de la Tm hacia 80 °C, patrón compatible con enriquecimiento en secuencias más estables; con base en ello se secuenciaron por NGS rondas intermedias y finales. El análisis bioinformático permitió identificar familias enriquecidas y priorizar candidatos, de los que varios mostraron contenido GC elevado, estructuras secundarias estables (ΔG entre –10.5 y −19.70 kcal/mol), potencial para formar motivos G-cuádruplex y valores de Kd en el rango nanomolar bajo. En conjunto, los resultados indican que la estrategia empleada permite superar las limitaciones de aproximaciones previas y obtener aptámeros frente a IgG de ratón con propiedades prometedoras para su aplicación como ligandos alternativos en ensayos de inmunodetección.