dianas 14(2) > Ramos-Beltrán y Palacios-Zambrano

dianas | Vol 14 Num 2 | septiembre 2025 | e202509fp05

El papel de la secuenciación de nueva generación (NGS) en la identificación de dianas terapéuticas en el cáncer de pulmón.

Laura Ramos Beltrán^1, 2, a, Sara Palacios Zambrano^2, b

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Departamento de Anatomía Patológica. Laboratorio de Dianas Terapéuticas, Hospital Universitario HM Sanchinarro, 28050, Madrid, España.

a. lramosb2002@gmail.com  b. spalacios@hmhospitales.com

Palabras clave: cáncer; NGS; diana terapéutica; variante genética; terapia dirigida

Resumen

El cáncer de pulmón constituye una de las principales causas de muerte por cáncer a nivel mundial. Esto se debe, en gran parte, a su mal pronóstico, pues se suele diagnosticar en estadios avanzados. Esta detección tardía se relaciona con la baja sensibilidad de los métodos convencionales para identificar el cáncer de manera precoz. La secuenciación de nueva generación (NGS) se presenta como una herramienta innovadora permitiendo un análisis exhaustivo del genoma, siendo capaz de identificar las alteraciones genéticas relevantes. Gracias a esta nueva tecnología se ha podido demostrar la elevada heterogeneidad que presentan los tumores pulmonares, con múltiples variantes genéticas. Las terapias dirigidas surgen para actuar sobre dianas terapéuticas específicas, reduciendo los efectos adversos asociados a los tratamientos convencionales y ofreciendo mejores resultados. La NGS no solo facilita la detección de alteraciones genéticas que coexisten en el microambiente tumoral, sino que además permite adaptar el tratamiento a las características moleculares de cada paciente, impulsando la medicina de precisión. Asimismo, esta herramienta ofrece la posibilidad a los pacientes de acceder a ensayos clínicos, permitiendo que éstos puedan tener acceso a terapias totalmente emergentes e innovadoras, pudiendo verse beneficiados. El objetivo del presente trabajo es realizar la revisión de todos los casos de cáncer de pulmón analizados en el Laboratorio de Dianas Terapéuticas (LDT) del Hospital HM Sanchinarro desde 2021 hasta la actualidad, con el fin de evaluar cómo la identificación de dianas terapéuticas ha contribuido a mejorar el pronóstico y a ofrecer un tratamiento personalizado al paciente.

dianas 14(2) > Muiños-Conde etal

dianas | Vol 14 Num 2 | septiembre 2025 | e202509fp04

Papel de la proteína tirosina fosfatasa SHP-1 como regulador de la expresión génica en la progresión del cáncer de próstata.

Iria Muiños Conde, Begoña Colás Escudero, Santiago Ropero Salinas

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.

a. iria.muinos@edu.uah.es  b. begona.colas@uah.es  c. santiago.ropero@uah.es

Palabras clave: cáncer de próstata resistente a la castración; SHP-1; RNAseq; expresión génica diferencial; ontología genética; fosforilación oxidativa

Resumen

El cáncer de próstata (CP) es una de las neoplasias malignas con mayor incidencia a nivel mundial en la población masculina. El desarrollo normal y patológico de la próstata está controlado por los andrógenos y el receptor de andrógenos, motivo por el cual los tratamientos actuales están dirigidos a inhibir su vía de señalización. Aunque en un primer momento los pacientes responden favorablemente, con el tiempo desarrollan resistencia y alcanzan un estadio más agresivo conocido como cáncer de próstata resistente a la castración (CRPC). Por lo tanto, es necesario conocer los mecanismos moleculares implicados en la adquisición de esta resistencia para poder mejorar las terapias ya existentes y desarrollar otras nuevas. Dado el interés que ha suscitado la proteína tirosina fosfatasa SHP-1 en el desarrollo del CP, el objetivo de este trabajo consistió en estudiar el efecto que ejerce esta fosfatasa en la regulación génica en dos líneas celulares de CP que representan estadios distintos de la enfermedad. Para ello se analizaron los resultados obtenidos en un RNAseq en el que se compararon los perfiles de expresión de estas líneas en presencia y ausencia de SHP-1. Este análisis mostró que la expresión de genes relacionados con la fosforilación oxidativa aumenta en la línea celular que representa el estadio CRPC y que el silenciamiento de SHP-1 produce su disminución, lo que apuntaría al posible papel oncogénico de esta fosfatasa en el CP.

dianas 14(2) > Morales-García etal

dianas | Vol 14 Num 2 | septiembre 2025 | e202509fp03

Implicación de PGAM en el mecanismo de acción del apMNKQ2.

Raquel Morales García, Raquel Ferreras Martín, Victor Manuel González

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Grupo de aptámeros, IRYCIS-Hospital Ramón y Cajal, Ctra. Colmenar km 9,100, 28034 Madrid, España.

a. raquel.moralesg@edu.uah.es  b. raquel.ferreras@hrc.es  c. victor.m.gonzalez@hrc.es

Palabras clave: Mnk1b; PGAM1; Transfección estable; mecanismo de acción

Resumen

El cáncer de mama triple negativo (TNBC) se caracteriza por su alta agresividad y falta de terapias dirigidas, lo que limita su tratamiento a la quimioterapia convencional. En este contexto, se han identificado nuevas dianas terapéuticas como las quinasas MNK, reguladas por la vía MAPK e implicadas en la progresión tumoral. La isoforma Mnk1b se ha asociado con peor pronóstico en pacientes con TNBC. El aptámero apMNKQ2, con alta afinidad por Mnk1b, ha mostrado efectos antitumorales en modelos de cáncer de mama. Estudios previos apuntan a un posible papel de la enzima glicolítica PGAM1 en el mecanismo de acción del aptámero, al observarse una disminución de su actividad y de la glucólisis celular tras el tratamiento, y una disminución de la forma ácida de la enzima, que podría asociarse con la reducción de fosforilaciones y/o acetilaciones. Este estudio tuvo como objetivo evaluar la implicación funcional de PGAM1 en el mecanismo de apMNKQ2, mediante la generación de un modelo de TNBC con sobreexpresión estable de PGAM1 en la línea MDA-MB-231. Los métodos de transfección utilizados produjeron poblaciones celulares con baja eficiencia de expresión del transgén, probablemente debido a la integración aleatoria del plásmido y a procesamiento no deseado. Por ello, se generaron clones celulares con expresión homogénea. Los ensayos de viabilidad indicaron que la sobreexpresión de PGAM1 parece atenuar la citotoxicidad del aptámero, sin afectar a la expresión de la enzima, pero sí reduciendo su actividad. Esto podría deberse a modificaciones postraduccionales de PGAM. Aunque el análisis del perfil de fosforilación mediante Phos-tag™ no mostró diferencias notables, la baja resolución de la técnica limita su interpretación. En conjunto, estos resultados preliminares apoyan una posible implicación de PGAM1 en la acción de apMNKQ2 y resaltan la necesidad de explorar su regulación postraduccional en estudios futuros.

dianas 14(2) > Claudia-García-García

dianas | Vol 14 Num 2 | septiembre 2025 | e202509fp02

Desarrollo y comercialización de un complemento alimenticio rico en vitamina.

Claudia García García

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.; Martínez Nieto S.A. – Av. del Carbono, 44, 30369 Los Camachos, Murcia.

claudiaaagg02@gmail.com

Palabras clave: complemento alimenticio; vitamina C; acerola; cápsula dura; legislación

Resumen

Actualmente, los complementos alimenticios han ganado gran popularidad en la sociedad gracias a los múltiples beneficios que ofrecen al organismo, ya que aportan nutrientes esenciales que ayudan a complementar la dieta diaria. En este contexto, el desarrollo de un formulado en cápsula dura, rico en vitamina C y extraído de fuentes naturales es una opción prometedora para la población. La vitamina C es un micronutriente conocido por su importante papel antioxidante. Además, contribuye a la formación de colágeno y ayuda a mantener el funcionamiento del sistema inmunitario, lo que la convierte en un compuesto clave para la salud general. En este estudio se abordan distintas fuentes naturales, con un alto contenido en vitamina C, con el fin de ofrecer alternativas frente a los compuestos sintéticos, más valoradas por los consumidores que buscan opciones naturales y saludables. En línea con la creciente preocupación por el medio ambiente, se valora especialmente el uso de técnicas de extracción más sostenibles, como aquellas que evitan el uso de solventes. El trabajo también aborda las distintas formas de administración de los complementos alimenticos, haciendo especial hincapié en las cápsulas duras. Se detalla su estructura, contenido, excipientes más utilizados, así como la fabricación de las mismas. Por otra parte, es importante realizar un análisis del producto terminado, centrándose en los ensayos fisicoquímicos, que incluyen ensayos organolépticos, de pesaje, de valoración, desintegración y disolución, y en los estudios de estabilidad. Estos últimos consisten en la realización de pruebas a lo largo de la vida útil del producto para evaluar la calidad, seguridad y eficacia bajo la influencia de factores ambientales. Asimismo, se consideran los requerimientos legales que regulan este tipo de productos, incluyendo el etiquetado, las alegaciones de salud autorizadas y las normas de comercialización.

dianas 14(2) > Carrascosa-Sánchez etal

dianas | Vol 14 Num 2 | septiembre 2025 | e202509fp01

Síntesis racional de inhibidores de la enzima HDAC6 para el tratamiento del Alzheimer.

Laura Carrascosa Sánchez, Óscar Bautista Aguilera, Isabel Iriepa Canalda

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Grupo de investigación DISCOBAC, Departamento de Química Orgánica y Química Inorgánica, Facultad de Farmacia, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares.

a. laura.carrascosa@edu.uah.es  b. oscar.bautista@uah.es  c. isabel.iriepa@uah.es

Palabras clave: HDAC6; Alzheimer; ácidos tiohidroxámicos; ácidos hidroxámicos

Resumen

La enfermedad del Alzheimer es una patología neurodegenerativa cuya incidencia representa uno de los principales desafíos a los que se enfrenta la sociedad actual, particularmente debido a la ausencia de terapias efectivas y al progresivo envejecimiento de la población. En los últimos años, se ha puesto de manifiesto el papel crucial que desempeñan los microtúbulos y el citoesqueleto celular en la fisiopatología de esta enfermedad, en estrecha relación con la hipótesis del Alzheimer basada en la disfunción de la proteína Tau. En este contexto, la histona desacetilasa 6 (HDAC6), una enzima citoplasmática sobre expresada en los pacientes que padecen esta enfermedad, ha surgido como una diana terapéutica prometedora debido a su relevante implicación en la desacetilación de α-tubulina, afectando así directamente la dinámica y estabilidad de los microtúbulos. El presente trabajo propone el diseño racional y la síntesis de nuevos inhibidores selectivos de HDAC6, con el objetivo de desarrollar tratamientos más eficaces frente a la enfermedad de Alzheimer. Tradicionalmente, los inhibidores de esta enzima han empleado ácidos hidroxámicos como grupos funcionales principales. En este estudio se propone la sustitución de dichos grupos por ácidos tiohidroxámicos, partiendo de la hipótesis de que estos compuestos, debido a sus propiedades estructurales, podrían conferir una mayor eficacia inhibidora, así como una mejor selectividad hacia HDAC6, en comparación con sus análogos hidroxámicos.

dianas 13(2) > Sarro-Miguel etal

dianas | Vol 13 Num 2 | septiembre 2024 | e202409fp06

Tratamiento con olaparib en células de hemangioblastomas de un paciente con la enfermedad de von Hippel-Lindau que presenta también una mutación en el gen CHEK2: un ejemplo de medicina personalizada in vitro.

Clara Sarro Miguel, Virginia Albiñana Díaz, Luisa María Botella Cubells, Lidia Ruiz Llorente

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Centro de Investigaciones Biológicas Margarita Salas (CIB).

a. clara.sarro@edu.uah.es

Palabras clave: von Hippel-Lindau; hemangioblastoma; VHL; CHEK2; olaparib

Resumen

La enfermedad de von Hippel-Lindau es una patología rara autosómica dominante que cursa con la aparición de tumores benignos en el sistema nervioso central, denominados hemangioblastomas. Su prevalencia es de 1:36.000. Los afectados de esta enfermedad presentan una mutación en el gen VHL, que está involucrado en diversas rutas de proliferación y angiogénesis, entre ellas la de HIFα. Esta enfermedad por lo general es familiar, heredándose la mutación en uno de los alelos de alguno de los progenitores. A pesar de esto, existe una gran variabilidad en los síntomas presentados y la gravedad de los mismos dentro de cada familia. Para que se formen los hemangioblastomas, es necesaria una segunda mutación en el otro alelo de VHL. Estudiamos un caso grave de von Hippel-Lindau en un paciente joven con un desarrollo de la enfermedad más agudo de lo normal. Se realizó un análisis proteico mediante Western Blot para detectar la presencia de proteína de VHL en cultivos de hemangioblastoma del paciente. Los resultados confirmaron la pérdida completa de la proteína en sus células mutadas. Es importante en este tipo de casos la atención personalizada a los pacientes, analizándose cada caso individualmente para obtener la mejor terapia posible para cada uno de ellos. Actualmente el único tratamiento real es la cirugía para extraer los tumores que generan síntomas graves. Es por tanto crucial encontrar fármacos que logren reducir el número de intervenciones que necesiten los afectados y que consigan parar el crecimiento de los tumores. Se analizó en este estudio también la eficacia de dos tratamientos posibles sobre las células del paciente, siendo estos ICI 118-551 y olaparib. Posteriormente, se analizó la viabilidad, observándose una reducción de esta con ambos tratamientos a diferentes niveles.

dianas 13(2) > Moreno-Sánchez y Nyåkern

dianas | Vol 13 Num 2 | septiembre 2024 | e202409fp05

Desarrollo de un Programa de Formación Avanzada en Ensayos Clínicos, Regulación y Gestión de Calidad para la Industria de Dispositivos Médicos.

Victoria Moreno Sánchez, Maria Nyåkern

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. ACR Consulting, Madrid.

a. victoria.morenosanch@edu.uah.es  b. maria.nyakern@acrconsulting.eu

Palabras clave: dispositivos médicos; formación avanzada; gestión de calidad; regulatory affairs; ensayos clínicos

Resumen

La industria de dispositivos médicos ha experimentado un crecimiento exponencial en los últimos años, impulsada por innovaciones tecnológicas y una mayor demanda de estos dispositivos debido en parte a un incremento de la edad media de vida, la pandemia por COVID, y la demanda pública existente de opciones de tratamientos menos invasivos, más seguros y efectivos. La industria es impulsada por profesionales de carreras como medicina, ingeniería o de ciencias de la salud, en parte por la gran innovación existente, y en parte por la gran regulación que requiere profesionales con un gran conocimiento en este campo. Sin embargo, hay una falta de profesionales en este campo. La formación disponible actualmente en este campo en España, y en muchos otros países en Europa, se limita a cursos de posgrado en entidades privadas [1], [2] o bien a la propia formación en empresas del sector, lo que genera una falta crítica de profesionales en el ámbito de los dispositivos médicos [3]. Este proyecto aborda esta brecha mediante el desarrollo de un programa de formación avanzada enfocado en como desarrollar ensayos clínicos, gestionar “regulatory affairs” para la tecnología de dispositivos médicos, y asegurar la gestión de calidad. Con el desarrollo de este programa de formación se busca asegurar que los profesionales puedan cumplir con los rigurosos estándares de calidad basados en la legislación europea. De esta manera, se busca continuar con la innovación en la industria de los dispositivos médicos, a la vez que se garantiza la seguridad de aquellos pacientes que dependan de estos productos. Además, la novedad que plantea esta formación es la accesibilidad a través de una plataforma educativa impulsada por inteligencia artificial (IA), ofreciendo una experiencia de aprendizaje personalizada y eficiente, que permita la autonomía del alumno de una manera guiada.

dianas 13(2) > del-Hierro-Marlasca y Pérez-de-Madrid-Jiménez

dianas | Vol 13 Num 2 | septiembre 2024 | e202409fp04

Estudio del efecto sinérgico de Aztreonam y Ceftazidima/Avibactam en cepas multirresistentes productoras de metalo-β-lactamasas causantes de infección/colonización en el Área Sanitaria de Guadalajara.

Laura del Hierro Marlasca, Sara Pérez de Madrid Jiménez

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Servicio de Microbiología, Hospital Universitario de Guadalajara, España.

a. lauradelhierro99@gmail.com  b. sperezde@sescam.jccm.es

Palabras clave: metalo-β-lactamasas; aztreonam; ceftazidima/avibactam; cefiderocol; enterobacterias; Pseudomonas spp.; sinergia

Resumen

Las infecciones causadas por bacilos gramnegativos multirresistentes se han visto incrementadas a nivel mundial en los últimos años, causando un grave problema de salud pública. La OMS en 2017 incluyó en la lista de patógenos prioritarios las cepas productoras de carbapenemasas, enzimas capaces de hidrolizar los antibióticos carbapémicos. Los bacilos gramnegativos productores de  metalo-β-lactamasas (MBL), un tipo de carbapenemasa, hidrolizan todos los β-lactámicos, a excepción del aztreonam. Sin embargo, la frecuente asociación de las MBL a otros tipos de β-lactamasas hace que el aztreonam rara vez sea efectivo in vitro. Por tanto, es un antibiótico que actualmente, en monoterapia, no está recomendado en las guías clínicas para tratar las infecciones causadas por estos microorganismos, suponiendo un gran reto terapéutico debido a la falta de antibióticos activos. Las alternativas terapéuticas para tratar de forma empírica que existen se limitan al uso de cefiderocol (amplio espectro), o a la combinación de aztreonam con avibactam (recientemente aprobado y sin comercializar), llevándonos a estudiar otras opciones terapéuticas. En este sentido, el objetivo del presente trabajo es evaluar la eficacia de la combinación de aztreonam y ceftazidima/avibactam, dos antibióticos ya comercializados y en uso, en infecciones causadas por bacterias productoras de MBL. Se realizó el estudio de sinergia de aztreonam y ceftazidima/avibactam en 45 cepas de bacilos gramnegativos multirresistentes procedentes de infecciones y colonizaciones, recogidas desde febrero de 2020 hasta mayo de 2024 en el Área Sanitaria de Guadalajara. El test de sinergia se realizó mediante el método de proporción fija usando tiras de gradiente de concentración. Nuestros resultados muestran un efecto sinérgico de ambos antibióticos frente a enterobacterias, por lo que se podría emplear como tratamiento empírico y como alternativa al cefiderocol; sin embargo, en  Pseudomonas spp. este efecto sinérgico es menor, por lo que su uso no estaría justificado en nuestro medio.

dianas 13(2) > de-Heras-Pino etal

dianas | Vol 13 Num 2 | septiembre 2024 | e202409fp03

Sulodexida: potencial tratamiento contra el daño endotelial provocado por toxinas urémicas.

Paloma de Heras Pino, Matilde Alique Aguilar, Andrea Figuer Rubio

1. Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Instituto Ramón y Cajal de Investigación Sanitaria (IRYCIS), 28034, Madrid, España.

a. palumica@gmail.com  b. matilde.alique@uah.es  c. andrea.figuer@edu.uah.es

Palabras clave: endotelio; estrés oxidativo; glicocálix; indoxil sulfato; inflamación; sulodexida

Resumen

Las enfermedades cardiovasculares (ECV) son la principal causa de mortalidad en la enfermedad renal crónica (ERC). El desarrollo de ECV es consecuencia del daño endotelial provocado por la acumulación de toxinas urémicas, como el indoxil sulfato (IS) causado por la pérdida de la función renal. Las toxinas urémicas degradan el glicocálix endotelial, barrera fundamental que asegura la permeabilidad selectiva del endotelio. Su daño provoca la activación de una serie de vías oxidativas, proinflamatorias y, finalmente, la senescencia celular. La sulodexida (SDX) es un fármaco compuesto de glucosaminoglucanos que reparan el glicocálix. El objetivo fue evaluar el posible papel preventivo de la SDX sobre la disfunción endotelial inducida por IS. Se planteó un modelo in vitro de ERC con células endoteliales pretratadas con de SDX (0,5 ULP/mL), 48 horas y posteriormente, se indujo daño con IS (250 µM) a diferentes tiempos. Se valoró el espesor del glicocálix con WGA (Wheat Germ Agglutinin) y midiendo los niveles de expresión proteica y génica de sindecan-1. El estrés oxidativo se determinó valorando la presencia de especies reactivas de oxígeno (ROS) mediante la sonda DCFDA/H2DCFDA y la expresión proteica de enzimas antioxidantes como la superóxido dismutasa 1 (SOD1) y catalasa. La inflamación se evaluó valorando la fosforilación de p65 y midiendo la expresión de MCP-1, IL-6 e ICAM-1. La senescencia celular se determinó midiendo la actividad β-galactosidasa y por Western blot de p53. La SDX evitó el daño en el glicocálix producido por IS aunque sin diferencias significativas en sindecan-1. Además, tuvo lugar una reducción de la producción de ROS, sin observar cambios en SOD1 y catalasa. También el IS indujo un fenotipo proinflamatorio, así como senescencia celular, la cual parecía ser frenada por la SDX. Por tanto, se concluye que la SDX tiene potencial como tratamiento preventivo del daño endotelial asociado a la ERC.