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dianas | Vol 12 Num 2 | septiembre 2023 | e202309fa01

Caracterización de la mutación C9ORF72 asociada a la esclerosis lateral amiotrófica familiar en linfoblastos derivados de pacientes

James Kevin Bradshaw Bernacchi^1, 2, a, Maria de Gracia Porras Franco^2, b, Ana Martínez^2, c

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Grupo de Química Médica y Biología Traslacional, Centro de Investigaciones Biológicas Margarita Salas del Consejo Superior de Investigaciones Científicas, 28040, Madrid, España.

a. james.k.bradshaw@outlook.com  b. graciapf@cib.csic.es  c. ana.martinez@csic.es

Palabras clave: esclerosis lateral amiotrófica; ELA; TDP-43; C9ORF72; linfoblastos; p62

Resumen

El objetivo de este estudio es caracterizar los mecanismos fisiopatológicos de la esclerosis lateral amiotrófica (ELA) en linfocitos inmortalizados de pacientes diagnosticados con la mutación de repetición del hexanucleótido (HRE) del gen C9ORF72. Concretamente, se desea observar la presencia o no de agregados de TDP-43 en el citoplasma de estos linfoblastos, ya que se considera un distintivo de la ELA familiar y esporádica. Además, se analizarán otras proteínas, especialmente p62, y la expresión de genes proinflamatorios como IL-1β, IL-6 y TNFα. La muestra de sangre de los pacientes de los cuales derivan los linfoblastos se extrajo en su segunda visita tras el diagnóstico de ELA y se confirmó la presencia de la mutación en C9ORF72. Todos los resultados se compararon frente a controles presuntamente libres de enfermedades neurodegenerativas. Los resultados indican que los pacientes no padecen acumulación citoplasmática ni agregación de TDP-43. Sin embargo, se ha observado la acumulación de p62 en la fracción insoluble de los lisados celulares, lo cual podría suponer la presencia de inclusiones de repeticiones de dipéptidos (DPRs) positivos en p62 y negativos en TDP-43, y/o una alteración de la autofagia. Además, los linfoblastos de pacientes son más resistentes a las condiciones de ayuno prolongado y generan menos especies reactivas de oxígeno que los controles. Por último, la expresión de ARNm de IL-1β, conocida por inducir neuroinflamación en la microglía de pacientes con ELA, está considerablemente aumentada respecto a los controles. Todos estos resultados podrían ayudar a descifrar los mecanismos patológicos de la ELA asociada a la mutación en el HRE de C9ORF72, permitiendo un futuro tratamiento personalizado centrado en esta mutación o en los estadios menos tardíos de la enfermedad.