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Dianas 2(2)

dianas Vol. 2 | No. 2 | Septiembre 2013
Dianas 2(2)
Monográfico

VII Máster en Dianas Terapéuticas en Señalización Celular, Investigación y Desarrollo – 2012-2013

Editores: M. J. Carmena y A. Domingo

El presente número incluye artículos correspondientes a Proyectos Fin de Máster seleccionados entre los presentados y defendidos al finalizar la séptima edición del Máster en Dianas Terapéuticas en Señalización Celular, Investigación y Desarrollo, en el curso 2012-2013.

Tabla de contenidos

Obtención de fármacos antitumorales a partir de organismos de origen marino: Jaspamida, un péptido procedente de la esponja Jaspis sp.
Regulación de la expresión de lamina A/C en la célula T y su papel en la diferenciación de CD4 naïve a célula efectora.
Aislamiento, purificación y elucidación de productos naturales con actividad antitumoral a partir de organismos marinos. Axinyssmide A y Axinyssmide C.
Evaluación de la seguridad y expediente de información del producto cosmético.
Bases moleculares de la selectividad de ligandos por receptores de melatonina.
Efecto de la queleritrina y de la ciclosporina sobre la peroxidación lipídica y receptores de somatostatina en hipocampo de rata con encefalomielitis autoinmune experimental.
Generación de vectores para la identificación de interacciones diferenciales de las isoformas de p85.
Parámetros estadísticos que respaldan la calidad de un ensayo HTS a lo largo de sus etapas: GPCR orexigénico como diana.

Dianas 2 (2) González-González y Sanz 2013 Parámetros estadísticos que respaldan la calidad de un ensayo HTS a lo largo de sus etapas: GPCR orexigénico como diana.

Dianas 2(2) > González-González y Sanz

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130908

Parámetros estadísticos que respaldan la calidad de un ensayo HTS a lo largo de sus etapas: GPCR orexigénico como diana.

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina,Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.

aireneggdf@gmail.com

Resumen

High throughput screening (HTS) es una de las fases más tempranas en el proceso de descubrimiento de un fármaco después de la elección-validación del target, en la que se busca, compuestos activos para dicha diana farmacológica, procedentes de un banco de compuestos sintéticos cuidadosamente seleccionados. Dada la importancia de esta fase, llevan un respaldo de calidad a lo largo de las distintas fases,desde el diseño del ensayo, la fase de adaptación o Set-up, HTS primario, hasta confirmación y dosis- respuesta. Parámetros estadísticos van a ser indicadores de la capacidad de los ensayos diseñados para identificar HITs con precisión, el Factor Z es uno de los más significativos, junto con la CV y la S/B que van a definir el performance del ensayo. Gracias a herramientas informáticas, se analizan estadísticamente los datos y se obtienen gráficas donde se aprecia con claridad los resultados de los ensayos y se sacan conclusiones

Cita: González González, Irene; Sanz, Ana Isabel (2013) Parámetros estadísticos que respaldan la calidad de un ensayo HTS a lo largo de sus etapas: GPCR orexigénico como diana. Dianas 2 (2): e20130908. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130908 http://www3.uah.es/dianas?e20130908. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © González-González I, Sanz AI. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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Dianas 2 (2) Vallejo-Díaz y Carrera 2013 Generación de vectores para la identificación de interacciones diferenciales de las isoformas de p85.

Dianas 2(2) > Vallejo-Díaz y Carrera

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130907

Generación de vectores para la identificación de interacciones diferenciales de las isoformas de p85.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina,Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Departamento de Inmunología y Oncología, Centro Nacional de Biotecnología/CSIC, Campus de Cantoblanco, Madrid E-28049, España.

ajevadi85@gmail.com

Resumen

PIK3R2 codifica la subunidad reguladora p85β de PI3K, un enzima que genera 3-polifosfoinosítidos en la membrana plasmática. La activación de PI3K dispara los mecanismos de supervivencia celular y migración. La sobreexpresión de p85β se ha observado en diferentes tipos de cáncer como mama y colon, y esta expresión elevada de p85β se correlaciona con un aumento de la señalización de PI3K y la progresión tumoral. La subunidad p85α se expresa de forma mayoritaria en las células normales, pero recientemente se ha demostrado que en algunos tumores se reducen los niveles de expresión de p85α y aumenta el de p85β (“p85β switch”). Este cambio en la expresión de p85 está correlacionado con la invasión y la progresión tumoral. En este trabajo trataremos de obtener herramientas de biología molecular que nos permitan determinar las interacciones diferenciales entre p85α y p85β con el objetivo de determinar la implicación de p85β en la supervivencia, migración e invasión celular.

Cita: Vallejo Díaz, Jesús; Carrera, Ana C. (2013) Generación de vectores para la identificación de interacciones diferenciales de las isoformas de p85. Dianas 2 (2): e20130907. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130907 http://www3.uah.es/dianas?e20130907. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © Vallejo-Díaz J, Carrera AC. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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Dianas 2 (2) Sobrino etal 2013 Efecto de la queleritrina y de la ciclosporina sobre la peroxidación lipídica y receptores de somatostatina en hipocampo de rata con encefalomielitis autoinmune experimental.

Dianas 2(2) > Sobrino etal

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130906

Efecto de la queleritrina y de la ciclosporina sobre la peroxidación lipídica y receptores de somatostatina en hipocampo de rata con encefalomielitis autoinmune experimental.

Departamento de Biología de Sistemas. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud. Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.

acsobri@yahoo.es

Resumen

La esclerosis múltiple (EM) es la causa principal de discapacidad neurológica en adultos jóvenes. La encefalomielitis autoinmune experimental crónica recidivante (EAE-CR) es un modelo animal de la EM. En dichas enfermedades existen infiltrados inflamatorios que contienen linfocitos T, macrófagos y un altogrado de estrés oxidativo en sustancia gris y blanca del sistema nervioso central (SNC).La proteína quinasa θ (PKC θ) se encuentra únicamente en linfocitos T. Se ha descrito que ratones genéticamente deficientes en PKC θ, son resistentes a la inducción de EAE-CR. Por lo tanto la PKC θ es una atractiva diana terapéutica para esta enfermedad. La EAE-CR se indujo en ratas Lewis hembra de 5 semanas de edad mediante inmunización con un homogenado de médula espinal de cobaya. Un grupo de ratas, fue tratado con el inhibidor de PKC α ciclosporina (0,4 mg/Kg), administrado mediante sonda gástrica. Un segundo grupo fue tratado con el inhibidor de PKC θ queleritrina (5 mg/Kg) por vía subcutánea. Ambos tratamientos se iniciaron dos días antes de la inmunización y se continuó mediante administración de dichos inhibidores de PKC, cada dos días hasta el momento del sacrificio. Las ratas se sacrificaron en el primer brote de la enfermedad mediante exanguinación por punción cardíaca y posteriormente se aisló elhipocampo. Las ratas con EAE-CR en grado 3 mostraron un aumento significativo de la peroxidación lipídica en el hipocampo y una disminución significativa de los niveles proteicos del receptor 3 de somatostatina (SSTR3). La administración de queleritrina y ciclosporina revirtieron parcialmente las alteraciones observadas en la EAE-CR. Estos resultados sugieren que la queleritrina puede ser beneficiosa en reducir la peroxidación lipídica y alteraciones secundarias a ella en la EAE-CR.

Cita: Sobrino, Carmen; Peinares, Aranzazu; Puebla Jiménez, Lilian; Arilla Ferreiro, Eduardo (2013) Efecto de la queleritrina y de la ciclosporina sobre la peroxidación lipídica y receptores de somatostatina en hipocampo de rata con encefalomielitis autoinmune experimental. Dianas 2 (2): e20130906. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130906 http://www3.uah.es/dianas?e20130906. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © Sobrino C, Peinares A, Puebla-Jiménez L, Arilla-Ferreiro E. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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Dianas 2 (2) Romera etal 2013 Bases moleculares de la selectividad de ligandos por receptores de melatonina.

Dianas 2(2) > Romera etal

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130905

Bases moleculares de la selectividad de ligandos por receptores de melatonina.

1. Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Área de Farmacología, Departamento de Ciencias Biomédicas, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  3. Departamento de Química Orgánica y Química Inorgánica, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares,Madrid, España.

ajulia.romera@uah.es

Resumen

La hormona melatonina (MT), o N-acetil-5-metoxitriptamina, secretada por la glándula pineal, es responsable de la regulación del sueño y el ritmo circadiano a través de la modulación del núcleo supraquiasmático, entre otras funciones. MT actúa sobre 2 receptores diferentes, MT1 (o MT1A) y MT2 (o MT1B), que funcionan acoplados a proteínas G (GPCR). La propia melatonina y otros agonistas de los receptores MT pueden ser usadas para marcar los ritmos circadianos, facilitar el sueño o ejercer un efecto en los osciladores periféricos. Por otro lado, los antagonistas de estos receptores se pueden utilizar para mejorar nuestra comprensión del papel de la MT en el organismo. Sin embargo, los trabajos de diseño molecular basados en la estructura se ven obstaculizados por la ausencia de un modelo tridimensional (3D) experimental de los receptores MT1 o MT2. Los modelos construidos por técnicas de homologíaayudan pero tanto el modo real de unión como el mecanismo de activación del receptor siguen estando definidos de forma imprecisa. En este trabajo, hemos utilizado las estructuras 3D recientemente publicadas de los receptores humanos 5-HT1B and 5-HT2B de serotonina (5HT) para construir modelos 3D de los receptores MT1 y MT2 humanos que sirven para explicar una serie de resultados experimentales, incluyendo los provenientes de estudios de mutagénesis dirigida y de selectividad de unión al receptorMT2 de una serie de ligandos sintéticos publicados en la literatura. Nuestros modelos también explican laconservación evolutiva de ciertos aminoácidos clave en toda la familia de receptores MT y destacan lasregiones del bolsillo de unión que pueden ser explotadas para conseguir perfiles distintos de selectividad entre los receptores de MT y 5HT.

Cita: Romera, Julia A.; Cortés-Cabrera, Álvaro; Sánchez-Murcia, Pedro A.; Álvarez-Builla, Julio; Gago, Federico (2013) Bases moleculares de la selectividad de ligandos por receptores de melatonina. Dianas 2 (2): e20130905. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130905 http://www3.uah.es/dianas?e20130905. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © Romera JA, Cortés-Cabrera, Sánchez-Murcia PA, Álvarez-Builla J, Gago F. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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Dianas 2 (2) López-García etal 2013 Evaluación de la seguridad y expediente de información del producto cosmético.

Dianas 2(2) > López-García etal

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130904

Evaluación de la seguridad y expediente de información del producto cosmético.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina,Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Laboratorio Rueda Farma, 28850, Torrejón de Ardoz, Madrid, España.

aalicia.lopezg89@gmail.com

Resumen

El Reglamento CE 1223/2009 de productos cosméticos se desarrolló para simplificar el marco legal en laUE y facilitar la libre circulación de productos cosméticos. Antes de la aprobación de dicho Reglamento se encontraba vigente la Directiva 76/768/ECC. El Reglamento CE 1223/2009 entró en vigor el 11 de enero de 2010 y su aplicación se hará efectiva el 11 de julio de 2013, por lo que a partir de esta fecha, todos los laboratorios que fabriquen productos cosméticos, deben elaborar un dossier toxicológico para cada unode sus productos cosméticos. El dossier toxicológico es una evaluación de la seguridad del producto cosmético y en él deben incluirse la fórmula cuali-cuantitativa del producto, la existencia de restricciones o reglamentaciones específicas para algún ingrediente, datos toxicológicos de los ingredientes, posiblesinteracciones, capacidad de absorción, margen de seguridad para los ingredientes más críticos.

Cita: López García, Alicia; Louzán Pardo, Tamara María; González Cesisergue, Sonia (2013) Evaluación de la seguridad y expediente de información del producto cosmético. Dianas 2 (2): e20130904. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130904 http://www3.uah.es/dianas?e20130904. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © López-García A, Louzán-Pardo TM, González-Cesisergue S. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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Dianas 2 (2) García-Centeno y Coello-Molinero 2013 Aislamiento, purificación y elucidación de productos naturales con actividad antitumoral a partir de organismos marinos. Axinyssmide A y Axinyssmide C.

Dianas 2(2) > García-Centeno y Coello-Molinero

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130903

Aislamiento, purificación y elucidación de productos naturales con actividad antitumoral a partir de organismos marinos. Axinyssmide A y Axinyssmide C.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina,Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. PharmaMar, Avenida de los Reyes, 1, Polígono Industrial La Mina Norte, 28770, Colmenar Viejo, Madrid, España.

aantonio.garcen@hotmail.com

Resumen

PharmaMar es una compañía biofarmacéutica dedicada a la investigación y desarrollo de medicamentos innovadores de origen marino para el área terapéutica de oncología. Concretamente el departamento de Productos Naturales es el encargado del aislamiento y la elucidación de moléculas con actividad citotóxica. En esta memoria se va a exponer todo el proceso de aislamiento de estas moléculas. Partiendo del organismo marino se va a detallar la extracción del mismo, el fraccionamiento y purificación por técnicas cromatográficas, así como la caracterización de dichas moléculas por resonancia magnética nuclear y espectrometría de masas. Concretamente se expondrá todo el proceso basándose en el ejemplo de dos moléculas, la Axinyssmide A y la Axinyssmide C extraídas de la esponja Axinyssa que se recogió en Dili y que poseen una citotoxicidad moderada.

Cita: García Centeno, Antonio; Coello Molinero, Laura (2013) Aislamiento, purificación y elucidación de productos naturales con actividad antitumoral a partir de organismos marinos. Axinyssmide A y Axinyssmide C. Dianas 2 (2): e20130903. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130903 http://www3.uah.es/dianas?e20130903. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © García-Centeno A, Coello-Molinero L. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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Dianas 2 (2) Del-Monte-Monge etal 2013 Regulación de la expresión de lamina A/C en la célula T y su papel en la diferenciación de CD4 naïve a célula efectora.

Dianas 2(2) > Del-Monte-Monge etal

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130902

Regulación de la expresión de lamina A/C en la célula T y su papel en la diferenciación de CD4 naïve a célula efectora.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina,Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Departamento de Epidemiología, Aterotrombosis e Imagen, Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares (CNIC), 28029 Madrid, España.

aa.delmontemonge@gmail.com

Resumen

La lamina A/C es una proteína nuclear con funciones estructurales y de regulación de la señalización celular y la transcripción de genes pero no se ha estudiado en detalle su papel en el sistema inmune. Los linfocitos T CD4+ naïve reconocen un antígeno presentado por una célula presentadora de antígeno (APC), se activan, proliferan y se diferencian a células efectoras para llevar a cabo funciones de respuesta inmune adaptativa. En la activación del linfocito T se producen eventos de señalización celular y transcripción de genes. Estudios previos en el laboratorio han mostrado que la lamina A/C se expresaen el linfocito T tras el reconocimiento de un antígeno para regular el grado de activación posterior del linfocito T. Como continuación, en este estudio se ha pretendido conocer las vías de señalización implicadas en la expresión de lamina A/C en el linfocito T así como establecer un posible papel de la lamina A/C en el proceso de diferenciación del linfocito T naïve a célula T efectora (Th). Para ello, con técnicas de citometría e inmunofluorescencia se ha analizado la expresión de lamina A/C en células T CD4+ de ratón estimulados a diferentes tiempos con y sin inhibidores de diferentes vías de señalización. Estos experimentos han mostrado una expresión transitoria de lamina A/C con un máximo a un día tras laestimulación así como un posible papel las vías de Src quinasas y de MAPK: ERK1/2 y p38 en esta inducción. El análisis por citometría de ensayos de activación, proliferación y diferenciación in vitro de células T CD4+ naïve de ratones WT y deficientes en lamina A/C ha mostrado que la lamina A/C tiene un papel fundamental en el proceso de diferenciación de la célula T CD4+naïve a Th1.

Cita: Del Monte Monge, Alberto; Blanco Berrocal, Marta; González Granado, José María; Andrés, Vicente (2013) Regulación de la expresión de lamina A/C en la célula T y su papel en la diferenciación de CD4 naïve a célula efectora. Dianas 2 (2): e20130902. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130902 http://www3.uah.es/dianas?e20130902. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © Del-Monte-Monge A, Blanco-Berrocal M, González-Granado JM, Andrés V. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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Dianas 2 (2) Bousoño-Rubio 2013 Obtención de fármacos antitumorales a partir de organismos de origen marino: Jaspamida, un péptido procedente de la esponja Jaspis sp.

Dianas 2(2) > Bousoño-Rubio

Dianas | Vol 2 Num 2 | septiembre 2013 | e20130901

Obtención de fármacos antitumorales a partir de organismos de origen marino: Jaspamida, un péptido procedente de la esponja Jaspis sp.

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina,Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.; Departamento de Química de Productos Naturales, PharmaMar S.A., 28770 Colmenar Viejo, Madrid, España.

virginia.bousono@gmail.com

Resumen

El cáncer es la segunda causa de mortalidad en Europa y Estados Unidos. Aunque el índice de supervivencia ha mejorado en los últimos años, muchas de las variantes de esta enfermedad aún no tienen cura, por lo que es necesario el descubrimiento y desarrollo de nuevos agentes terapéuticos para combatirla. En la actualidad existe un creciente interés en la búsqueda de moléculas de potencial actividad procedentes del mar, ya que la gran diversidad química y biológica del medio marino es un amplio recurso para la búsqueda de nuevos fármacos antitumorales. El hecho de que el número de fármacos de origen marino descubiertos vaya en aumento se debe a la producción de metabolitos secundarios por parte de los organismos, los cuales han demostrado tener gran valor como agentes citotóxicos. Entre los distintos grupos taxonómicos marinos destaca el de las esponjas (filo Porifera), en el que se han centrado la mayoría de los estudios hasta la actualidad, por su elevada producción de metabolitos secundarios. En el presente estudio se describe el proceso de aislamiento y purificación mediante técnicas cromatográficas, valoración de actividad antitumoral y elucidación estructural mediante resonancia magnética nuclear de la jaspamida a partir de una muestra de Jaspis sp. tomada en Tomori. Son muchos los estudios que avalan el potencial antitumoral de la jaspamida en numerosas líneas celulares de cáncer. El proceso se llevó a cabo en el Departamento de Química de Productos Naturales de PharmaMar, compañía farmacéutica líder en el descubrimiento de tratamientos de origen marino contra el cáncer.

Cita: Bousoño Rubio, Virginia (2013) Obtención de fármacos antitumorales a partir de organismos de origen marino: Jaspamida, un péptido procedente de la esponja Jaspis sp. Dianas 2 (2): e20130901. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e20130901 http://www3.uah.es/dianas?e20130901. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: © Bousoño-Rubio V. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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