dianas 9(1) > Díaz-Gago etal

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003a06

Estudio de la dependencia y regulación de la síntesis de ácidos grasos en células tumorales tiroideas que expresan el oncogén ^V600EBRAF.

Sergio Díaz Gago, Beatriz Gallego Tamayo, Pablo Baquero Valls, Antonio Chiloeches Gálvez

Universidad de Alcalá.

a. sergio.diazgago@edu.uah.es

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020.
16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Cáncer de tiroides; V600EBRAF; Síntesis de ácidos grasos; C75

Resumen

El cáncer de tiroides es la malignidad más común del sistema endocrino. El subtipo de cáncer de tiroides más agresivo es el carcinoma anaplásico tiroideo (ATC). Una mutación frecuentemente observada en los ATC es ^V600EBRAF, la cual provoca la activación constitutiva de la quinasa, favoreciendo así la progresión tumoral. Durante el tratamiento consistente en la inhibición de ^V600EBRAF, en algunos casos, se desarrollan resistencias, por lo que es necesario la búsqueda de nuevas terapias para el tratamiento de tumores con dicha mutación. Puesto que las células tumorales dependen en gran medida del metabolismo lipídico para satisfacer sus requerimientos proliferativos y energéticos, su modulación ofrece una buena opción para el desarrollo de nuevas terapias dirigidas. De hecho, se ha observado que la inhibición de rutas metabólicas, como la síntesis de ácidos grasos (AG), tiene efectos antiproliferativos en células tumorales. Por ello, nuestro objetivo es determinar si las células 8505C y BHT101, derivadas de ATC y que expresan ^V600EBRAF, dependen de la síntesis de AG para su supervivencia. Nuestros resultados demuestran que las células dependen de la síntesis de AG para la supervivencia celular, debido a que el C75, un inhibidor de la ácido graso sintasa (FASN), provoca un descenso en la viabilidad dependiente de la dosis y tiempo empleados. Este descenso en la viabilidad se debe a que el C75 provoca un arresto del ciclo celular en las fases G₂/M que acaba induciendo muerte celular por apoptosis. Posteriormente, habiendo visto la dependencia de nuestras células por la síntesis de AG, estudiamos la posible regulación que ejerce ^V600EBRAF en la expresión y/o actividad de enzimas implicadas en dicha ruta. El inhibidor de ^V600EBRAF PLX4720 provoca un descenso en la expresión de FASN, explicable por el hecho de que también descienden los niveles de SREBP1 maduro. El descenso en los niveles de proteínas implicadas en la lipogénesis se debe a que la inhibición de ^V600EBRAF, y por tanto de la vía ERK/MAPK, provoca la activación de AMPK y la inhibición de mTORC1, siendo ambos reguladores del proceso de maduración de SREBP1. Además, la inhibición la vía ERK/MAPK que provoca el PLX4720 aumenta la fosforilación inhibitoria, producida por AMPK, en la acetil-CoA carboxilasa (ACC), por lo que disminuye su actividad. Por último, estudiamos el uso de la terapia combinada consistente en la inhibición conjunta de ^V600EBRAF y la síntesis de AG. El uso combinado de PLX4720 y C75 no tiene efecto aditivo en la inhibición de la viabilidad ni en la inducción de la apoptosis. Esto puede ser debido a que ambos inhibidores provocan arrestos del ciclo celular en distintas fases, así como efectos contrarios de la actividad de proteínas como ERK, mTORC1 y AMPK, y por tanto, ejercen efectos opuestos en la maduración de SREBP1.

dianas 9(1) > Yago-Ibáñez etal

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003a05

El efecto antitumoral de DIDS en células de cáncer de próstata PC3: una nueva función para un viejo compuesto.

Julia Yago-Ibáñez, Juan Manuel Martínez-Romero, Francisco Javier Lucio-Cazaña, Ana Belén Fernández-Martínez

Facultad de Ciencias de la Universidad Autónoma de Madrid.

a. julia.yago@uam.es

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020.
16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Prostaglandina E2; DIDS; Próstata; Cáncer

Resumen

La prostaglandina E2 (PGE2) es un mediador inflamatorio que está sobreexpresado en diferentes tipos de tumores, entre ellos el de próstata. Este incremento de PGE2 se relaciona con la promoción de los principales fenotipos tumorales (proliferación, migración e invasión, y pérdida de adhesión celular). Nuestro grupo de investigación ha demostrado que en la línea celular PC3, representativa del cáncer de próstata resistente a la castración (la fase más avanzada y letal de esta patología), PGE2 debe acceder al interior celular e interactuar con sus receptores intracelulares, para desencadenar sus efectos protumorales. Es por ello por lo que impedir el acceso al interior celular disminuiría o inhibiría la progresión del tumor. En este proyecto hemos utilizado DIDS, un inhibidor del transportador de prostaglandinas al interior de la célula para impedir la recaptación de PGE2 sintetizada y liberada por las células tumorales y estudiar sus efectos sobre los fenotipos celulares: viabilidad celular (mediante ensayo de MTT), proliferación (mediante incorporación de BrdU), migración e invasión (en cámara Transwell), adhesión. Los resultados muestran que DIDS regula todos los fenotipos tumorales y disminuye la viabilidad celular mediante la inducción de necrosis. DIDS apunta ser un nuevo tratamiento para los estadios más avanzados del cáncer de próstata para los que, actualmente, no existe ningún tratamiento efectivo.

dianas 9(1) > Sánchez etal

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003a04

La capsaicina activa AMPK a través de LKB1 en células tumorales de próstata.

Belén G. Sánchez, Alicia Bort, José M. Mora-Rodríguez, Irene de Miguel, Pedro A. Mateos-Gómez, Inés Díaz-Laviada

Universidad de Alcalá.

a. belensg.88@gmail.com

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020.
16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Keywords: Capsaicina; AMPK; cáncer de próstata; LKB1

Abstract

En los últimos años, los compuestos naturales han cobrado especial atención en el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas frente al cáncer. La capsaicina, el alcaloide responsable del sabor picante de los pimientos, muestra actividad antineoplásica en muchas líneas celulares, así como en experimentos in vivo. Recientemente, nuestro grupo ha demostrado que la capsaicina aumenta los efectos antiproliferativos del docetaxel, el agente quimioterapéutico de primera línea en cáncer de próstata; y que sus propiedades antitumorales y sinérgicas están asociadas a la activación de la quinasa activada por AMP, AMPK. El objetivo de este estudio ha sido determinar el mecanismo por el que la capsaicina activa AMPK en las células tumorales de próstata. Los resultados obtenidos mostraron que el tratamiento con dosis crecientes de capsaicina inhibía el crecimiento y aumentaba la apoptosis de las células LNCaP y PC3 y, en menor medida, de las DU-145. Igualmente, la capsaicina activó AMPK en todas las líneas celulares excepto en DU-145, la cual posee una deleción de la quinasa hepática B1 (LKB1). Estos datos sugieren que LKB1 está implicada en el mecanismo de activación de AMPK que lleva a cabo la capsaicina. Además, la disminución de la expresión de LKB1 en las células LNCaP y PC3 impidió que la capsaicina activase AMPK. Por tanto, nuestros resultados sugieren que la capsaicina inhibe la proliferación e induce la apoptosis de células de cáncer de próstata humano mediante la activación del eje de señalización LKB1/AMPK.

dianas 9(1) > de-Miguel etal

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003a03

Estudio de la relevancia como diana terapéutica de la DNA polimerasa Theta en la progresión del cáncer de próstata.

Irene de Miguel, J.M Mora-Rodríguez, Belén Sánchez-Gómez, Alicia Bort, Nieves Rodríguez-Henche, Inés Díaz-Laviada, Pedro A. Mateos-Gómez

Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

a. irenedemiguelgarcia@gmail.com  b. ines.diazlaviada@uah.es  c. pedroantonio.mateos@uah.es

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020.
16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Cáncer de próstata; A-NHEJ; Rotura de doble cadena, DNA polimerasa Theta; diana terapéutica

Resumen

La DNA polimerasa Theta (POLQ) ha sido identificada como una proteína fundamental en uno de los mecanismos de reparación de roturas de ADN de doble cadena (DSB), la unión de extremos no homólogos alternativa o Alternative Non-Homologous end-joining (A-NHEJ). El empleo de este mecanismo de reparación que es mutagénico, favorece las alteraciones de la secuencia del DNA, reordenamientos cromosómicos y la inestabilidad genómica, factores que contribuyen al desarrollo de los tumores. La expresión de POLQ es baja en tejidos normales, mientras que su expresión está aumentada en ciertos tipos de tumores, incluidos pulmón, estómago, colon, mama, melanoma y carcinomas de células escamosas orales. La sobreexpresión se ha correlacionado con un peor pronóstico para el paciente y una peor respuesta a los tratamientos. El cáncer de próstata (CP) es el segundo cáncer más común en hombres en todo el mundo y la quinta causa de muerte por cáncer en varones. A pesar de las diversas opciones terapéuticas, en un alto porcentaje de los casos aparecen resistencias y se progresa hasta alcanzar un estadio incurable de la enfermedad, resaltando la importancia en la identificación de nuevas dianas terapéuticas. Además, un gran número de estudios revelan una acumulación de alteraciones genéticas a medida que el CP progresa que afectan a otras vías de reparación de los DSB, sugiriendo un papel importante en la evolución del tumor. Los experimentos llevados a cabo por nuestro grupo sugieren que POLQ es fundamental para la supervivencia de células de CP, ya que su silenciamiento reduce tanto la viabilidad celular como la capacidad para formar colonias en diversas líneas tumorales de CP. Nuestra hipótesis, es, por tanto, que la reparación de DSB mediada por POLQ es fundamental para la progresión de los tumores de próstata. El objetivo del estudio es dilucidar el papel que POLQ puede desempeñar en la supervivencia de las células de CP, así como en la progresión tumoral y en la adquisición de resistencia a los tratamientos actuales.

dianas 9(1) > Carrión-Marchante etal

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003a01

Un aptámero frente a MNK1 como agente antitumoral en cáncer de pulmón.

Rebeca Carrión-Marchante, Celia Pinto-Díez, José Ignacio Klett-Mingo, Víctor M González, María Elena Martín

Fundación IRYCIS. Hospital Ramón y Cajal Ctra. Colmenar, Km. 9,100 28034 Madrid.

a. rebeca.carrion@hrc.es; rebecacm93@gmail.com

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020.
16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Aptámero; apMNKQ2; MNK; cáncer de pulmón; terapia

Resumen

El factor de iniciación eucariótico 4E (eIF4E) es esencial en el proceso de traducción de proteínas. Su sobreexpresión está relacionada con un aumento en la traducción de mRNAs implicados en procesos oncogénicos. Las proteínas quinasas que interaccionan con MAP quinasas (MNKs) regulan la fosforilación de eIF4E, lo que es indispensable para su acción oncogénica. Diferentes estudios demuestran un aumento en la fosforilación de MNK1 y eIF4E en diferentes tipos de tumores, lo que correlaciona con una peor supervivencia en pacientes con cáncer de pulmón no microcítico (NSCLC). El cáncer de pulmón es una de las enfermedades más frecuentemente diagnosticadas en los últimos años a nivel mundial, junto con el cáncer de mama, colon y próstata, y presenta unas elevadas tasas de malignidad y mortalidad. En nuestro laboratorio se seleccionó y optimizó un aptámero frente a la proteína MNK1 (apMNKQ2) que, actualmente, está siendo validado en cáncer de mama. El objetivo de este estudio es determinar si el aptámero apMNKQ2 puede ser una herramienta terapéutica en cáncer de pulmón no microcítico a través de ensayos funcionales en las líneas celulares A549, SW900 y H460, representativas de los tres tipos de NSCLC, adenocarcinoma, carcinoma escamoso y carcinoma de células grandes. Los ensayos relacionados con la progresión tumoral muestran que el aptámero produce apoptosis en las líneas tumorales, disminuyendo la viabilidad celular y su capacidad de formación de colonias. Los ensayos relacionados con características metastásicas muestran que el aptámero disminuye la capacidad migratoria de las células tanto en ensayos de herida como en ensayos con transwells. Estos resultados indican que apMNKQ2 tiene actividad antitumoral en células de cáncer de pulmón mostrando su gran potencial como herramienta terapéutica en cáncer de pulmón no microcítico.