dianas 8(1) > Mínguez-Martínez etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903c15

Enfermedad de Addison: kit para el diagnóstico temprano.

Jorge Mínguez Martínez, Ane Rivas Macho, Alfonso Rodrigo Porcel, Lucía Tejedor Santamaría, Henar Tomero Sanz

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión C1, Dianas Terapéuticas.

Resumen

La enfermedad de Addison es una enfermedad de origen autoinmune, en la que se da una destrucción de la corteza suprarrenal a través de anticuerpos contra esta. Esta destrucción es lenta y cuenta con la aparición de síntomas inespecíficos, desde psíquicos hasta físicos. Normalmente, el diagnóstico de esta enfermedad es tardío y se determina cuando se ha producido la destrucción de en torno a un 90% de la corteza suprarrenal. Muchas patologías pueden desembocar en la enfermedad de Addison, siendo la adrenalitis autoinmune la causa mayoritaria. Los pacientes afectados por adrenalitis autoinmune, así como otras enfermedades asociadas serán los pacientes de riesgo, principales beneficiarios de este modelo de kit para el diagnóstico temprano de la enfermedad de Addison. En esta adrenalitis autoinmune ocurre una alteración de la presentación antigénica protagonizada por la presencia de autoanticuerpos contra la enzima 21-hidroxilasa. Nuestra propuesta, por tanto, se basa en un kit diagnóstico que pueda detectar la presencia temprana de estos anticuerpos a baja concentración en sangre. Para ello, producimos una proteína de fusión recombinante, que incluya la región antigénica de la 21-hidroxilasa y una proteína de unión a manosa. El diseño del kit incluiría dos pocillos control, uno positivo y otro negativo, y otros dos pocillos para la muestra. La presencia de estos autoanticuerpos se detectará por unión a la región antigénica y una segunda incubación con un anticuerpo conjugado con quantum dots 655 nm, el cual emite una señal detectable mediante microscopía de fluorescencia. A pesar de que este proyecto es fundamentalmente teórico, nuestro objetivo principal es aumentar la eficacia del diagnóstico actual en la enfermedad de Addison, para mejorar el pronóstico de estos pacientes. Con ello, se podrían llevar a cabo nuevas investigaciones que conduzcan a tratamientos innovadores, y servir como modelo de diagnóstico temprano para otras enfermedades de origen autoinmune.

dianas 8(1) > Carbajosa-Castellano etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903c14

Resistencia hipofisaria a la hormona tiroidea.

María Carbajosa Castellano, María de la Sierra Espinar buitrago, Esther Martino Zamarriego, Sandra Sivill Mencía

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión C1, Dianas Terapéuticas.

dianas 8(1) > Medel-Martínez etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903c13

Miocardiopatía arritmogénica (MCA). Modelo de terapia personalizada.

Ana Medel Martínez, Irene Alosete Palacios, Laura Bonilla Ciudad, Paula Ayuso García

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión C1, Dianas Terapéuticas.

Resumen

La miocardiopatía arritmogénica (MCA) o displasia del ventrículo derecho es una enfermedad rara que se caracteriza por cambios morfológicos y funcionales: sustitución de tejido cardiaco por tejido fibro-adiposo, arritmias y pérdida de uniones adherentes en los discos intercalares. Ya que el mayor factor de riesgo implicado es el ejercicio físico, esta patología tiene mayor incidencia entre los jóvenes menores de 35 años y deportistas, llegando a causar hasta en un 23% de los casos de muerte súbita. Un mal diagnóstico junto con este elevado porcentaje hacen que la prevalencia de la MCA esté subestimada y, como consecuencia, que no se haya desarrollado un tratamiento adecuado. Dentro de esta patología encontramos distintas mutaciones, siendo las más relevantes las de proteínas desmosomales. La placofilina-2 (PKP2) actúa como una proteína scaffold implicada en la formación de las distintas uniones célula-célula del corazón y en la localización de los canales iónicos, responsables de la transmisión del impulso eléctrico. Su relevancia en el funcionamiento del sincitio funcional, además del alto porcentaje de mutaciones patológicas que presenta hace de la PKP2 una novedosa diana terapéutica. Dichas mutaciones, que en homocigosis son letales, se encuentran en heterocigosis generando una haplodeficiencia en la proteína de interés. Con todo esto, el objetivo del proyecto es la propuesta de un tratamiento personalizado que persigue la reversión de los efectos causados por la haplodeficiencia de PKP2. La estrategia tendrá dos abordajes: el silenciamiento del alelo mutado mediante miRNA y un incremento de la proteína wild type (wt). Para ello, se utilizará como vehículo exosomas que contengan el miRNA específico de la mutación y el mRNA de la proteína wt que serán dirigidos a tejido cardiaco.

dianas 8(1) > Garcia etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903c12

Nueva estrategia antiinflamatoria en aterosclerosis basada en el inflamasoma NLRP3.

Rodrigo Garcia, Paula Gutierrez, Marina Higuera, Paula Moreno, Daniela Poullion

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión C1, Dianas Terapéuticas.

Resumen

La aterosclerosis es una de las enfermedades cardiovasculares de mayor prevalencia a nivel mundial. Históricamente su fisiopatología se ha centrado en el papel de los lípidos y su rol en el desarrollo de la placa de ateroma. En los últimos años, diversos estudios han demostrado la gran relevancia del componente inflamatorio en la patogénesis de la aterosclerosis, en concreto, la Interleucina 1 Beta (IL-1β) ha demostrado tener un papel fundamental en esta patología. Basándonos en esta evidencia, desarrollamos un estudio teórico de las posibles vías inflamatorias relacionadas con IL-1B implicadas en la inflamación vascular, valorando diversas alternativas como eventuales dianas terapéuticas. De entre ellas, destacamos el complejo inflamasoma Receptor tipo NOD asociado a proteína 3 (NLRP3), cuya asociación conduce a la activación y liberación de IL-1B e interleucina 18 (IL-18), ambas citoquinas proaterogénicas. Para la obtención de posibles inhibidores del inflamasoma NLRP3 a partir de nuestra quimioteca de más de 2 millones de compuestos, se propuso un análisis de tipo High Throughput Screening (HTS) en el que se empleó una técnica de tipo transferencia de energía basada en resonancia de fluorescencia (FRET). De este análisis FRET se obtuvieron aquellos inhibidores específicos de la asociación entre los componentes del inflamasoma NLRP3, denominados Hits. Esta búsqueda se refinó mediante ensayos in vitro con células THP1 deficientes de NLRP3. Se obtuvieron así aquellos compuestos de baja toxicidad que antagonizaban el inflamasoma NLRP3, produciendo una menor liberación de IL1B e IL-18, considerados nuestros Leads o cabezas de serie. Finalmente, los candidatos se utilizaron en estudios in vivo con ratones ApoE (-/-) con el objetivo de confirmar su eficacia y potencia farmacológica.

dianas 8(1) > Baños-Sánchez etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903c11

Búsqueda de agonistas LGR4 como antirresortivos en el tratamiento de la osteoporosis (comunicación).

Nerea Baños-Sánchez, Esperanza Lezana-Juberías, Irene Miguel-García, Lucía Serrano-García

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión C1, Dianas Terapéuticas.

Resumen

La osteoporosis es una enfermedad metabólica caracterizada por la pérdida de masa ósea, el deterioro del tejido óseo y la alteración de la microarquitectura ósea. Es un problema sanitario a nivel global, afectando a más de 200 millones de personas. Dado que la esperanza de vida va aumentando conforme al paso de los años, la osteoporosis está cada vez más cerca de ser una epidemia mundial. Actualmente no se ha desarrollado ningún fármaco capaz de remitir por completo la osteoporosis, únicamente frenan el proceso. Por ello, surge la necesidad de desarrollar nuevos tratamientos que sean efectivos y seguros a largo plazo. El hueso es un tejido que está en constante formación y destrucción, fenómeno conocido como remodelado óseo. La fisiopatología de la osteopororis se basa en un desequilibrio de este remodelado, donde la formación se ve disminuida mientras que la resorción está aumentada. Dado que este desequilibrio resulta en el desarrollo de enfermedades óseas es fundamental una regulación estricta de la diferenciación de los osteoclastos, responsables de la reabsorción. La diferenciación de los osteoclastos está regulada por los osteoblastos a través de la secreción de dos moléculas, RANKL y OPG. Recientemente se ha identificado la presencia de un nuevo receptor para RANKL en osteoclastos, el receptor 4 acoplado a la proteína G que contiene repeticiones ricas en leucina (LGR4). LGR4 compite con RANK por la unión a RANKL, por lo que atenúa la activación de RANK. Además, la activación de LGR4 activa Gαq, que resulta en la activación de GSK3-β, responsable de la fosforilación de NFAT-C1 y la consiguiente salida del núcleo. De este modo, NFAT-C1 no transcribe los genes responsables de la osteoclastogénesis. Por todo ello, LGR4 ejerce un importante papel en el control de la diferenciación de los osteoclastos mediante mecanismos de retroalimentación negativa. Nuestro objetivo es desarrollar terapias que potencien estos mecanismos de regulación intrínsecos y consigan frenar la resorción ósea. Con este fin, proponemos LGR4 como diana a partir de la cual potenciar dicha regulación negativa. Las terapias antirresortivas actuales se han focalizado sobre RANK y RANKL con el objetivo de bloquear dicha señalización. Sin embargo, el bloqueo de la señalización desde RANK suprime los mecanismos de retroalimentación negativa intrínsecos. Por tanto, proponemos que la estimulación de LGR4 mediante el uso de agonistas podría ser un buen objetivo terapéutico para tratar la osteoporosis. Por ello, se ha diseñado un ensayo de cribado de alto rendimiento o high trough screening (HTS) in vitro mediante el cual se determina la activación de LGR4. A continuación, se realiza un segundo cribado con el fin de descartar aquellos compuestos que además de estimular nuestra diana, también activen RANK y promuevan en último término la diferenciación a osteoclastos, evento contrario a nuestro objetivo.