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dianas | Vol 13 Num 1 | marzo 2024 | e202403x029

Ingeniería de vesículas extracelulares como vectores de ácidos nucleicos: Un enfoque traslacional.

Alberto Cook-Calvete^a, María Delgado-Marin, Sara Jorquera-Ortega, Marta Saura

Universidad de Alcalá.

a. mcooky_8@hotmail.com

IX Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2024.
XVIII Simposio de Dianas Terapéuticas.
18 a 22 de marzo, 2024. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Vesículas Extracelulares; miRNA199a-3p; Enfermedades Cardiovasculares

Resumen

Las vesículas extracelulares (VEs) representan un gran potencial como nuevos vectores de ácidos nucleicos a diferentes tejidos. Los investigadores han explorado diversos métodos para introducir poros en las VEs, facilitando la encapsulación de ácidos nucleicos con fines terapéuticos. Este estudio tuvo como objetivo desarrollar nuevas estrategias para encapsular miARNs con propiedades cardioprotectoras en sistemas de entrega mediados por EVs y probar su eficacia en un modelo de infarto de miocardio en ratones.
Se aislaron VEs del medio de cultivo de células endoteliales aórticas inmortales de ratón (iMAEC) o del suero de ratones mediante ultracentrifugación diferencial. Se probaron diferentes técnicas, como electroportación, saponificación y sonicación, para encapsular ácidos nucleicos en VEs. La eficiencia de encapsulación de miméticos de miARNs en VEs se evaluó mediante cuantificación en un espectrofotómetro Nanodrop.
El estudio se centró inicialmente en examinar la cinética de internalización de miARNs por células receptoras (iMAEC) a través de la entrega mediada por VEs, comparándola con la transfección con lipofectamina. El siARN-UBC encapsulado en VEs obtenidas de iMAEC se entregó consistentemente en las células, lo que sugiere que las VEs podrían actuar potencialmente como eficaces vectores de ácidos nucleicos. Además, las VEs mostraron una alta capacidad para proteger el material genético encapsulado de la degradación, confirmando aún más su papel crucial como transportadores protectores.
Para evaluar su eficacia como vectores in vivo, ratones C57BL6 a los que se les ligó la arteria coronaria descendente anterior izquierda fueron inyectados con miARN-199a-3p cardioprotector o un miARN aleatorio encapsulado en VEs. Sorprendentemente, el tratamiento con EVs-miR199a atenuó la remodelación ventricular, evidenciada por una menor área fibrosa y un aumento del grosor del ventrículo izquierdo en comparación con los controles, lo que sugiere una entrega eficiente del miARN protector.
En conclusión, este estudio resalta el potencial de las VEs modificadas como vectores altamente eficientes para la entrega de ácidos nucleicos en intervenciones terapéuticas, particularmente en la regeneración miocárdica, ofreciendo prometedoras vías para futuras traducciones clínicas en el campo de las enfermedades cardiovasculares. Estos hallazgos convincentes justifican una investigación más profunda sobre los mecanismos subyacentes de la entrega mediada por VEs, allanando el camino para nuevas estrategias terapéuticas en medicina cardiovascular.