dianas 7(1) > Sanmartín-Salinas etal

dianas | Vol 7 Num 1 | marzo 2018 | e201803a15fp

El Substrato del receptor de Insulina-4 está sobreexpresado en el cáncer colorrectal y promueve la activación del ciclo celular a través de la vía Rb/E2F.

Patricia Sanmartín Salinas^1, a, M. Val Toledo Lobo², Fernando Noguerales Fraguas^3, 4, Miguel Toro Londoño¹, Antonio Jiménez Ruiz¹, Luis González Guijarro^1, 5

1. Departmento de Biología de Sistemas, Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Universidad de Alcalá, Alcalá de Henares, España.  2. Departamento de Biomedicina y Biotecnología, Unidad de Biología celular, Universidad de Alcalá, Alcalá de Henares, España.  3. Departamento de Cirugía, Ciencias Médicas y Sociales, Universidad de Alcalá, Alcalá de Henares, España.  4. Departamento de Cirugía general, Hospital Príncipe de Asturias, Alcalá de Henares, España.  5. Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Hepáticas y Digestivas (CIBEREHD), España.

a. patry.sanmartin@gmail.com

Palabras clave: IRS4 nuclear; proliferación celular; cáncer colorrectal; ciclo celular; IRS4

Resumen

El substrato del receptor de insulina 4 (IRS-4) es una proteína adaptadora muy poco estudiada y la hipótesis que relaciona su función con el desarrollo tumoral cada vez gana más fuerza. Los estudios se llevaron a cabo in vitro (línea celular de cáncer de colon RKO) e in vivo, utilizando biopsias humanas de cáncer colorrectal (n%@3D20) y tejido normal adyacente (n%@3D20). El tratamiento con dosis fisiológicas de IGF-1 produjo una translocación subcelular de IRS-4 desde el citoplasma hacia el núcleo en células RKO. La sobreexpresión de IRS-4 en dichas células dio lugar a un aumento de la proteína fosforilada del retinoblastoma (pRb Ser 809/811 y pRb Ser 705), así como de la expresión de E2F, ciclina E y ciclina D1, comparado con las células control. Algunos de estos cambios fueron parcialmente revertidos al tratar las células con wortmanina. En cuanto a los estudios realizados en las muestras de pacientes con CCR se observó mediante fraccionamiento subcelular una clara sobreexpresión de IRS-4 en el citoplasma, membrana y núcleo, mientras que los niveles de proteína fueron prácticamente indetectables en los tres compartimentos del tejido normal. Estudios inmunohistoquímicos mostraron una tinción nuclear positiva de IRS-4 en el 74% de las células tumorales. La sobreexpresión de IRS-4 en las muestras de pacientes con CCR se correlacionó positivamente y de forma significativa con el incremento de proteínas importantes del ciclo celular como ciclina D1 (r %@3D 0.6662), Rb (r %@3D 0.7779), pRb serina 809/811 (r %@3D 0.6864), pRb serina 705 (r %@3D 0.6261) y E2F1 (r %@3D 0.8702). Nuestros resultados sugieren que el IRS-4 promueve la activación del ciclo celular a través de la activación de la vía Rb/E2F y podría servir como una diana farmacológica dada su sobreexpresión en el tejido tumoral y sus niveles apenas detectables en el tejido normal.

dianas 7(1) > Agudiez etal

dianas | Vol 7 Num 1 | marzo 2018 | e201803c13fp

Pardeamiento de la grasa para combatir la obesidad.

Marta Agudiez, Sofía Campillo, Maria Galvez, Carlota Tosat, Aina Catalina Mesquida

Universidad de Alcalá. Master Universitario en Dianas Terapéuticas en Señalización Celular, Investigación y Desarrollo.

a. magudiezperez18@gmail.com  b. sofiacam@ucm.es  c. m.galvezs@hotmail.com  d. carlotatbitri@gmail.com  e. ainacmesquida@gmail.com

Palabras clave: obesidad; γ-secretasa; tratamiento; High Throughput Screening (HTS); nanopartículas

Resumen

La obesidad, definida como una acumulación excesiva de grasa corporal, se ha llegado a definir como la pandemia del siglo XXI. Tradicionalmente se ha atribuido al desequilibrio entre la ingesta y el gasto de energía o a la ausencia de actividad física pero hoy en día se sabe que existe una relación con otras enfermedades y que el factor genético es responsable, de al menos, un 33% de los casos. La fisiopatología de la obesidad cursa con una inflamación crónica y la implicación de distintas vías de señalización entre las que destaca la vía Notch. Además, se distinguen dos tipos de grasa (grasa blanca y grasa parda) tanto por su histología como por la expresión de distintos marcadores (UCP-1 específico de la grasa parda). Mientras que la grasa blanca actúa como reservorio de energía, la grasa parda tiene una función de termogénesis. Es por ello que se ha elegido el pardeamiento de la grasa (o transformación de grasa blanca en grasa parda mediado por la vía Notch) como proceso para la búsqueda de un posible tratamiento contra la obesidad. Con este objetivo se propone la realización de un ensayo de High Throughput Screening o HTS libre de células basado en la tecnología AlpaLISA para el cribado de una biblioteca de más de 2 millones de compuestos que nos permita identificar posibles compuestos candidatos capaces de inhibir la actividad de la y-secretasa (diana farmacológica elegida). Con el objetivo de aumentar la eficacia y disminuir la toxicidad de los compuestos candidatos generados, se desarrollaron distintos estudios tanto in vitro como in vivo y se propuso un mecanismo de vehiculización basado en nanopartículas compuestas por PLGA (poly lactide-co glycolide) con un marcador específico de tejido adiposo para la óptima acción del fármaco.

dianas 7(1) > Calvo-Serrano etal

dianas | Vol 7 Num 1 | marzo 2018 | e201803c11fp

Búsqueda de agonistas de PPARγ para el tratamiento de la enfermedad de Huntington.

Silvia Calvo Serrano, Daniel Gutiérrez Tejedor, Lorena Peracho Benito, Laura Ramos Hernández, Belén Sánchez Gómez, Rebeca Sandoica Expósito

Máster en Dianas Terapéuticas en Señalización Celular, Investigación y Desarrollo. Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá. 28871, Alcalá de Henares, Madrid. España.

a. silcalser@gmail.com  b. danielgutierreztejedor@gmail.com  c. lorenaperacho95@gmail.com  d. laura.lrhz@gmail.com  e. belensg.88@gmail.com  f. rebecca.sandoica@gmail.com

Palabras clave: enfermedad de Huntington; huntingtina; PPARγ; diana terapéutica; ensayos HTS

Resumen

La enfermedad de Huntington (EH) es una enfermedad autosómica dominante que se caracteriza por un deterioro neurológico progresivo. Es uno de los trastornos hereditarios monogénicos más comunes en países occidentales, y el tiempo de supervivencia medio es de 15-20 años tras la manifestación de los primeros síntomas [1]. Actualmente no se ha desarrollado ningún fármaco que permita la remisión de la enfermedad, solo existen tratamientos paliativos. La fisiopatología de esta enfermedad se caracteriza por la acumulación de más de 35 repeticiones de trinucleótidos CAG (cola poliQ) en el gen que codifica para la proteína huntingtina (Htt). La presencia de Htt mutada da lugar a la acumulación de agregados intracelulares tóxicos y a la alteración de diferentes procesos celulares: desregulación de la expresión génica, alteración de la degradación y el plegamiento de proteínas, interrupción de la señalización sináptica y alteración del metabolismo energético, donde tiene un papel importante el receptor nuclear PPARγ [2]. En base a estos procesos, sugerimos dos dianas moleculares que aparecen principalmente alteradas en EH: Htt y PPARγ. Existen fármacos antidiabéticos agonistas de PPARγ que han demostrado efectos neuroprotectores en modelos experimentales de EH, como la Rosiglitazona, retirado por cardiotoxicidad [3]. Por tanto, proponemos iniciar una búsqueda de agonistas de PPARγ mediante la obtención de una colección de nuevas moléculas y la síntesis de compuestos derivados de la Rosiglitazona, con el fin de disminuir su cardiotoxicidad. Estas moléculas se someterían a un cribado de alto rendimiento mediante dos ensayos in vitro: uno de activación de PPARγ, y otro de paso de barrera hematoencefálica. Por último, habría que realizar ensayos preclínicos adicionales para determinar la eficacia y los posibles efectos secundarios de los fármacos seleccionados.

dianas 7(1) > Bort etal

dianas | Vol 7 Num 1 | marzo 2018 | e201803a11fp

Nuevo activador de AMPK como agente antitumoral en cáncer de próstata.

Alicia Bort, Belén Sánchez-Gómez, Pedro Mateos-Gómez, Ana Castro, Nieves Rodríguez-Henche, Inés Díaz-Laviada

1. Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá. 28871, Alcalá de Henares, E-28871, Madrid, España.  2. Instituto de Química Médica (IQM-CSIC), Juan de la Cierva 3, E-28006, Madrid, España.

a. aliciabort@gmail.com  b. belensg.88@gmail.com  c. pedroantonio.mateos@uah.es  d. acastro@1qm.csic.es  e. nieves.rhenche@uah.es  f. ines.laviada@uah.es

Palabras clave: AMPK; diana terapéutica; derivados de oxindol, cáncer de próstata

Resumen

La quinasa activada por adenosín monofosfato (AMPK) es una serín-treonín quinasa formada por tres subunidades, una catalítica (α) y dos reguladoras (β y γ), que actúa como sensor de la energía celular inhibiendo procesos anabólicos y activando procesos catabólicos. Recientemente se ha observado que además ejerce otras funciones como el bloqueo del ciclo celular o la regulación de la autofagia. Por ello se ha convertido en un objetivo terapéutico para el tratamiento del cáncer. AMPK tiene especial importancia en cáncer de próstata, ya que la activación de la vía lipogénica se correlaciona con la progresión y la agresividad del tumor. El objetivo de este trabajo ha sido valorar el efecto de una nueva serie de derivados de 2-oxindol con sobre la actividad de AMPK, así como su perfil antitumoral en células de cáncer de próstata. Uno de los compuestos estudiados 8c, activó significativamente AMPK en células de cáncer de próstata PC-3, DU145 y LNCaP, inhibiendo a la vez su viabilidad celular. El compuesto 8c redujo notablemente el crecimiento de tumores de células PC3 trasplantados en ratones. En conclusión, nuestros resultados muestran que un nuevo derivado fluorado del 2-oxindol presenta un efecto antitumoral in vivo en células de cáncer de próstata a través de la activación de AMPK, dándonos una estrategia terapéutica prometedora para el tratamiento del cáncer de próstata andrógeno-independiente.