dianas 11(1) > González-Cofrade etal

dianas | Vol 11 Num 1 | marzo 2022 | e202203e08

Dehydrohispanolone derivative is a potent inhibitor of NLRP3 inflammasome activation.

Laura González-Cofrade, Irene Cuadrado, Ana Estévez-Braun, Sonsoles Hortelano, Beatriz de las Heras

Departamento de Farmacología, Farmacognosia y Botánica. Facultad de Farmacia, Universidad Complutense de Madrid.

a. lagonz11@ucm.es

VII Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2022.
14 a 18 de marzo, 2022. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Keywords: Diterpene, macrophages, inflammasome NLRP3, IL-1beta.

Abstract

The NLRP3 inflammasome is a multi-protein complex that plays a crucial role in the pathogenesis of several inflammatory diseases. It mediates caspase-1 activation leading to the maturation and secretion of pro-inflammatory cytokines IL-1β and IL-18 from cells of the innate immune system. Besides, caspase-1 activation also induces a type of cell death called pyroptosis. Despite being a potential target for the treatment of inflammatory diseases, there are no specific NLRP3 inhibitors available clinically to date. Among natural products, the bioactive diterpene hispanolone and its derivatives have shown anti-inflammatory effects. In the present study, we have evaluated the effects of a dehydrohispanolone derivative (N8) as NLRP3 inflammasome inhibitor and the molecular targets underlying its mechanism of action. The results revealed that N8 specifically blocked NLRP3 activation in J774A.1 macrophages. N8 significantly reduced IL-1β release and caspase-1 activity after activation by diverse stimuli (LPS + Nigericin, ATP or MSU), with an IC50 in the range of 10-20 µM. N8 treatment also reduced cleaved IL-1β and caspase-1 p10 protein expression, although expression of NLRP3 complex components (NLRP3, ASC, pro-IL-1β and pro-caspase-1) was not affected. Attenuation of pyroptosis was also observed in the presence of this compound. Similar results were obtained in bone marrow derived macrophages. Thus, dehydrohispanolone derivative N8 is postulated as a promising potent NLRP3 inflammasome inhibitor.

dianas 11(1) > Klett-Mingo etal

dianas | Vol 11 Num 1 | marzo 2022 | e202203e07

Selección y caracterización de aptámeros frente a HAT1. Potencial uso terapéutico en cáncer de pulmón.

José Ignacio Klett-Mingo, Julio Cambronero-Plaza, Celia Pinto-Díez, Rebeca Carrión-Marchante, Miriam Barragán-Usero, María Val Toledo-Lobo, Víctor Manuel González, María Elena Martín

IRYCIS-HRC, Cr. Colmenar Viejo, Km. 9,100 CP 28034, MADRID.

a. klett_86@hotmail.com

VII Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2022.
14 a 18 de marzo, 2022. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Aptámeros; SELEX; HAT1; Diana terapéutica; Inhibición

Resumen

El cáncer de pulmón es una de las principales causas de muerte a nivel mundial y el más común entre todos los tipos de cáncer. A pesar de los avances científicos de los últimos años, que han permitido el desarrollo de nuevos abordajes diagnósticos y terapéuticos, la búsqueda de nuevos tratamientos y de un diagnóstico precoz de la enfermedad siguen siendo una necesidad absoluta en oncología. La Histona Acetiltransferasa 1 (HAT1) pertenece a la familia de enzimas HATs. De hecho, fue la primera que se describió dentro de este grupo, aunque es la más desconocida. Sin embargo, en los últimos años ha despertado un interés creciente debido a su implicación en múltiples patologías. La sobreexpresión de esta enzima está relacionada, entre otras, con infecciones virales, enfermedades inflamatorias, y cáncer, donde está asociada a un mal pronóstico y una baja supervivencia. Así, muchos autores proponen a HAT1 como una potencial diana terapéutica. Los aptámeros son oligonucleótidos de ARN o ADN de cadena sencilla, obtenidos a partir de librerías de oligonucleótidos por evolución sistemática de ligandos mediante enriquecimiento exponencial (SELEX), que se estructuran con una conformación tridimensional y se unen a una molécula diana con alta especificidad y afinidad. Esto los hace postularse como candidatos excepcionales para su utilización como herramientas de diagnóstico o como agentes antagonistas o agonistas de dianas terapéuticas, entre otros. En este trabajo se desarrollaron aptámeros frente a HAT1 con actividad inhibitoria. Después de 6 rondas de selección, se obtuvieron 2 aptámeros específicos y afines frente a esta diana, que posteriormente se caracterizaron y optimizaron. Ambos aptámeros y una de sus secuencias modificadas reconocieron HAT1 con una alta afinidad y especificidad, y fueron capaces de inhibir la actividad acetil transferasa de HAT1, siendo los principales candidatos a mostrar actividad terapéutica. Además, los estudios en cultivos celulares mostraron que el aptámero apHAT610 presenta una IC50 en el rango nanomolar en las 3 líneas celulares de cáncer de pulmón utilizadas, induciendo apoptosis e inhibiendo la formación de colonias. Todos estos resultados postulan al aptámero apHAT610 como un potencial fármaco para el tratamiento del cáncer de pulmón.

dianas 11(1) > Pérez etal

dianas | Vol 11 Num 1 | marzo 2022 | e202203e06

Modelo in vitro para la evaluación de nuevos agentes terapéuticos para el tratamiento de Enfermedades pulmonares intersticiales difusas (EPIDs).

Andrea Pérez, Paloma Acebo, Sonsoles Hortelano

Instituto de Salud Carlos III/Instituto de Investigación de Enfermedades Raras (ISCIII/IIER).

a. andrea.perez@isciii.es

VII Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2022.
14 a 18 de marzo, 2022. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Enfermedades pulmonares intersticiales difusas; Inflamación; Metabolismo lipídico; Macrófagos; Terpenos

Resumen

Las enfermedades pulmonares intersticiales difusas (EPIDs) constituyen un grupo heterogéneo de enfermedades que afectan a las vías respiratorias, principalmente a las estructuras alveolo-intersticiales y que presentan manifestaciones clínicas comunes. La incidencia y la prevalencia de las EPIDs son muy variables. En España se estima que la incidencia es de 7.6 casos por cada 100.000 habitantes. Algunas de estas patologías manifiestan una relación entre la inflamación del tejido pulmonar y cambios en el metabolismo, como es el caso de la proteinosis alveolar pulmonar, en la que se ha caracterizado una alteración del metabolismo lipídico de los macrófagos alveolares. Con el objetivo de profundizar en el estudio de los mecanismos que conducen a estas alteraciones y buscar nuevos agentes terapéuticos hemos puesto a punto un modelo in vitro consistente en el cultivo de macrófagos alveolares en presencia de ácido oleico. El ácido oleico induce la acumulación de lípidos en estructuras conocidas como gotas lipídicas o “lipid droplet” similares a las que se observan en estas patologías. Utilizaremos este modelo para identificar nuevos agentes terapéuticos con capacidad para inhibir la formación de los “lipid droplet”. Así, estudiaremos la actividad de diferentes compuestos derivados de terpenos. Los terpenos son productos naturales bioactivos presentes en numerosos organismos y cuya actividad antiinflamatoria ha sido ampliamente descrita, por lo que son candidatos muy interesantes como nuevos agentes terapéuticos en estas patologías.