dianas 8(1) > Madrigal-Martínez etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a14

La prostaglandina E2 intracelular activa los fenotipos tumorales en cáncer de próstata de forma dependiente del factor inducible por hipoxia 1α.

Antonio Madrigal-Martínez^a, Ana Fernández-Martínez, Javier Lucio-Cazaña

a. antoniomadrigalmartinez@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A1, Cáncer.

Resumen

La prostaglandina E2 (PGE2) y el factor inducible por hipoxia 1α (HIF-1α) juegan un papel importante en cáncer de próstata (CP). PGE2 es capaz de incrementar la proliferación, migración e invasión celular, disminuir la adhesión celular y aumentar la angiogénesis. HIF-1α modula la transcripción de numerosos genes que contribuyen a la progresión del CP. Estudios previos de nuestro grupo de investigación han demostrado que PGE2 intracelular (iPGE2) aumenta la expresión de HIF-1α en la línea celular PC3, representativa de un estadio andrógeno-independiente de CP. Nuestra hipótesis sería si iPGE2 activa los fenotipos tumorales de forma dependiente de HIF-1α en PC3. Los resultados obtenidos muestran que la inhibición de HIF-1α bloquea los efectos de PGE2 sobre los fenotipos tumorales en células PC3. Estos resultados sugieren que el aumento de expresión de HIF-1α es fundamental para que iPGE2 active los diferentes fenotipos tumorales, contribuyendo así a la progresión de CP.

dianas 8(1) > Bort etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a13

La capsaicina activa AMPK en células HepG2 a través de CaMKKβ (comunicación).

Alicia Bort, Belén G. Sánchez, Pedro Mateos-Gómez, Irene de Miguel, Nieves Rodríguez-Henche, Inés. Díaz-Laviada

a. aliciabort@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A1, Cáncer.

Resumen

Los compuestos naturales que tienen efectos beneficiosos para la salud han tomado relevancia como nuevos fármacos, al presentar la capacidad de modular distintos procesos celulares. Dentro de este grupo encontramos la capsaicina que es la responsable de la “sensación de calor” que produce el picante. Recientemente ha provocado gran interés debido a sus efectos antitumorales en muchos tipos de células, aunque su mecanismo de acción en muchos casos no ha sido descrito. Como recientemente se ha descrito que la desregulación metabólica es una característica de las células cancerosas y la quinasa activada por AMP (AMPK) es el sensor clave en el metabolismo, en este estudio decidimos estudiar la capacidad de la capsaicina para modular la actividad de AMPK. Los resultados mostraron que la capsaicina activaba la AMPK en las células HepG2 al aumentar la fosforilación de la AMPK y su sustrato directo ACC. Por otro lado, determinamos que la activación de AMPK inducida por capsaicina, se producía a través de la proteína quinasa de la quinasa dependiente de calcio/calmodulina tipo β (CaMKKβ) ya que su activación con el inhibidor de CaMKK STO-609 o silenciando la proteína con siRNA. Además, la capsaicina disminuyó la viabilidad celular en células HepG2, descubriendo que AMPK está involucrada en este efecto de muerte producido por la capsaicina.

dianas 8(1) > Martínez-Martínez etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a12

Resveratrol sensibiliza las células de cáncer de próstata a la acción del Cisplatino y promueve apoptosis a través de la inducción de la fosfatasa DUSP1.

Desirée Martínez-Martínez, Altea Soto, Beatriz Gallego, Antonio Chiloeches, Marina Lasa

Instituto de Investigaciones Biomédicas Alberto Sols, CSIC-UAM.

a. desireemartinezmartinez@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A1, Cáncer.

Palabras clave: apoptosis; cisplatino; DUSP1; cáncer de próstata; resveratrol

Resumen

Resveratrol es un polifenol con propiedades antitumorales frente al cáncer de próstata, sin embargo, el mecanismo que subyace a sus efectos no ha sido completamente elucidado. Dado que previamente hemos demostrado que la fosfatasa DUSP1 induce apoptosis en células de cáncer de próstata, en este estudio, hemos querido analizar el papel de esta fosfatasa en los efectos de Resveratrol. Además, hemos analizado la eficacia del tratamiento combinado de Resveratrol con el agente quimioterápico Cisplatino sobre la viabilidad celular y la apoptosis, así como su relación con DUSP1 en células de cáncer de próstata. Nuestros resultados muestran que Resveratrol induce la expresión de DUSP1 en células de cáncer de próstata y que esta fosfatasa está implicada en la inhibición de la vía de NF-κB y de la expresión de Cox-2 mediada por el polifenol. Además, DUSP1 media la apoptosis inducida por Resveratrol, aunque no está involucrada en el arresto del ciclo celular que provoca dicho compuesto. Por último, nuestros datos demuestran que Resveratrol coopera con el agente quimioterápico Cisplatino en la regulación positiva de los niveles de DUSP1 y en la promoción de apoptosis, sugiriendo que esta fosfatasa juega un papel determinante en la sensibilización celular a la apoptosis inducida por Cisplatino. Estos resultados revelan un nuevo mecanismo mediante el cual Resveratrol induce apoptosis en células de cáncer de próstata, y resaltan la importancia de DUSP1 en nuevos enfoques terapéuticos basados en el uso de la combinación del polifenol y el cisplatino.

dianas 8(1) > Sánchez-Baltasar etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a11

Generación de modelos animales de tumores de mama deficientes en Rasa1.

Raquel Sánchez-Baltasar, Angustias Page, Isabel Ojeda-Pérez, Claudia Gil-Pitarch, Manuel Navarro, Ángel Ramírez

CIEMAT-Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre.

a. raquel.sanchez@externos.ciemat.es

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España
Sesión A1, Cáncer.

Palabras clave: Cáncer de mama, Rasa1, Tpr53, CRISPR/Cas9

Resumen

El cáncer de mama es el tipo de tumor que ocupa el primer puesto en incidencia en la población femenina mundial y es uno de los que mayor mortalidad causa. A pesar de que es frecuente encontrar mutaciones en los genes clásicos de la familia de Ras en otros tipos tumorales, no lo es en cáncer de mama, aunque la vía se encuentra frecuentemente sobreactivada en algunos subtipos como los triple negativos o basales. Estudios previos en nuestro laboratorio sugieren que esto puede deberse a la pérdida alélica de RASA1 en concomitancia con mutaciones en el gen TP53, eventos frecuentes en estos subtipos tumorales que son los más agresivos y de peor pronóstico. Por ello, hemos decidido llevar a cabo un estudio en profundidad de los mecanismos moleculares que llevan al desarrollo y/o progresión del cáncer de mama como consecuencia de la alteración de estos dos genes. En consecuencia, se planteó la generación de modelos animales deficientes en Rasa1 en combinación con mutaciones en Trp53 con el objetivo de confirmar la colaboración de la activación de la vía de Ras y p53 como causante de cáncer de mama. Para el desarrollo de estos modelos animales modificados genéticamente se empleó la tecnología CRISPR/Cas9. Para ello, se diseñó una pareja de guías específicas para el gen Rasa1 con el objetivo de utilizarlas mediante dos aproximaciones diferentes. En primer lugar, con el objetivo futuro de realizar el aloinjerto de células de glándula mamaria electroporadas con las guías diseñadas para Rasa1 (e infectadas con un vector lentiviral para la sobreexpresión de una forma mutada de p53), se realizó una puesta a punto extrayendo y purificando estas células de hembras donadoras e infectándolas con un vector lentiviral que expresa la proteína GFP para trasplantarlas en la almohadilla grasa desepitelizada de hembras receptoras. Por otro lado, se empleó la tecnología CRISPR/Cas9 para realizar la edición del gen Rasa1 en estadio embrionario. Las guías específicas para este gen se introdujeron en los zigotos junto con la Cas9 en forma de ribononucleoproteína mediante electroporación por dos métodos: iGonad (“Oviductal Nucleic Acids Delivery”) o ZEN (“Zygote Electroporation of Nucleases”). En el modelo de aloinjerto se observó una reconstitución del epitelio de la glándula mamaria con las células trasplantadas a 2 meses post-trasplante, verificando la utilidad de esta aproximación para la generación de nuestro modelo. Respecto a la electroporación de los zigotos, aunque con el método iGonad no se vio edición en ninguno de los casos, con el método ZEN se consiguió un 75% de edición, donde en más del 80% de estos animales se observó un cambio de expresión de la proteína RASA1. En conclusión, tanto la aproximación del aloinjerto en la glándula mamaria como la utilización del método ZEN para la generación de modelos animales modificados genéticamente con la tecnología CRISPR/Cas9 para el gen Rasa1, pueden ser una buena aproximación para el estudio de la implicación de este gen en el cáncer de mama.