dianas 8(1) > Gallego-Tamayo etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a21

El bloqueo de la glucolisis colabora con la eficacia terapéutica de la inhibición de V600EBRAF en células tumorales tiroideas

Beatriz Gallego Tamayo^a, Sergio Gago Díaz, Antonio Chiloeches Gálvez

a. bgallego28@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A2, Cáncer.

Palabras clave: glucolisis; 2-Deoxyglucosa; V600EBRAF; cáncer; tiroides

Resumen

El cáncer de tiroides es el tumor endocrino más común y, aunque es altamente curativo, presenta una elevada tasa de recurrencia [1]. Una de las mutaciones más frecuentes en este tipo de tumores es la sustitución de la Valina 600 por un Glutámico (V600E) en la proteína BRAF. Esta mutación causa una hiperactivación de la vía de las ERK-MAPKs, favoreciendo la proliferación e invasividad tumoral e inhibiendo la muerte celular por apoptosis [2,3]. Sin embargo, las terapias con inhibidores de BRAF no dan los resultados esperados en el tratamiento del cáncer de tiroides, ya que, por una parte, estas células crean resistencia a este tratamiento y, por otra, causan importantes efectos adversos en la piel asociados a hiperproliferación llegando, en algunos casos, a producirse carcinomas de células escamosas y queratoacantomas en un 15-30% de los pacientes [4]. Debido a esto, se plantea la necesidad de utilizar terapias combinadas para aumentar la efectividad y especificidad del tratamiento en este tipo de cáncer. Por otra parte, las células tumorales reprograman su metabolismo energético por modificaciones en la expresión y actividad de enzimas metabólicas, para favorecer la proliferación acelerada. Por ello, el metabolismo de las células tumorales es una diana emergente para el tratamiento del cáncer, pudiendo usarse como terapia combinada con otros compuestos para aumentar la eficacia del tratamiento [5-8]. Estudios previos de nuestro laboratorio nos indican que la glucolisis es necesaria para la supervivencia de las células tumorales tiroideas con el oncogén V600EBRAF, por ello estudiamos la posibilidad terapéutica de combinar la inhibición glucolítica con la 2-Desoxyglucosa (2DG) y la inhibición de BRAF con PLX4720. Nosotros demostramos, en primer lugar, que tanto la inhibición del metabolismo de la glucosa, con el compuesto 2-Deoxyglucosa, como la inhibición del oncogén, disminuyen la captura de glucosa y producción de lactato, en la línea celular BHT101, derivada de un tumor anaplásico tiroideo. A continuación, estudiamos como la inhibición conjunta del oncogén V600EBRAF y del metabolismo glucolítico afectan a la viabilidad y supervivencia de las células BHT101 tanto in vitro, mediante distintas técnicas como MTT, capacidad de formación de colonias, TMRM, análisis del ciclo celular y determinación de células no viables positivas en ioduro de propidio por citometría de flujo; como in vivo, tras la generación de tumores xenografos en ratones nude tratados con los tratamientos individuales o en combinación. Los resultados obtenidos permiten concluir que la inhibición conjunta del oncogén V600EBRAF y la glucolisis aumenta la muerte celular in vitro, de forma independiente a apoptosis. Este efecto terapéutico también se observa in vivo en cuanto al tamaño tumoral en células anaplásicas tumorales tiroideas. Además, la modulación que ejercen sobre la glucolisis ambos tratamientos parece estar relacionada con cambios en la actividad de las proteínas implicadas en el metabolismos energético de las vías AMPK/ACC y mTOR/S6K, según muestran sus niveles de fosforilación medidos por WB. Finalmente, concluimos que la inhibición de la glucolisis con 2DG podría ser usado como terapia en los tumores tiroideos con la mutación V600EBRAF que no responden adecuadamente al tratamiento convencional con PLX4720.

dianas 8(1) > Madrigal-Martínez etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a14

La prostaglandina E2 intracelular activa los fenotipos tumorales en cáncer de próstata de forma dependiente del factor inducible por hipoxia 1α.

Antonio Madrigal-Martínez, Ana Fernández-Martínez, Javier Lucio-Cazaña

a. antoniomadrigalmartinez@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A1, Cáncer.

Resumen

La prostaglandina E2 (PGE2) y el factor inducible por hipoxia 1α (HIF-1α) juegan un papel importante en cáncer de próstata (CP). PGE2 es capaz de incrementar la proliferación, migración e invasión celular, disminuir la adhesión celular y aumentar la angiogénesis. HIF-1α modula la transcripción de numerosos genes que contribuyen a la progresión del CP. Estudios previos de nuestro grupo de investigación han demostrado que PGE2 intracelular (iPGE2) aumenta la expresión de HIF-1α en la línea celular PC3, representativa de un estadio andrógeno-independiente de CP. Nuestra hipótesis sería si iPGE2 activa los fenotipos tumorales de forma dependiente de HIF-1α en PC3. Los resultados obtenidos muestran que la inhibición de HIF-1α bloquea los efectos de PGE2 sobre los fenotipos tumorales en células PC3. Estos resultados sugieren que el aumento de expresión de HIF-1α es fundamental para que iPGE2 active los diferentes fenotipos tumorales, contribuyendo así a la progresión de CP.

dianas 8(1) > Bort etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a13

La capsaicina activa AMPK en células HepG2 a través de CaMKKβ (comunicación).

Alicia Bort, Belén G. Sánchez, Pedro Mateos-Gómez, Irene de Miguel, Nieves Rodríguez-Henche, Inés. Díaz-Laviada

a. aliciabort@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A1, Cáncer.

Resumen

Los compuestos naturales que tienen efectos beneficiosos para la salud han tomado relevancia como nuevos fármacos, al presentar la capacidad de modular distintos procesos celulares. Dentro de este grupo encontramos la capsaicina que es la responsable de la “sensación de calor” que produce el picante. Recientemente ha provocado gran interés debido a sus efectos antitumorales en muchos tipos de células, aunque su mecanismo de acción en muchos casos no ha sido descrito. Como recientemente se ha descrito que la desregulación metabólica es una característica de las células cancerosas y la quinasa activada por AMP (AMPK) es el sensor clave en el metabolismo, en este estudio decidimos estudiar la capacidad de la capsaicina para modular la actividad de AMPK. Los resultados mostraron que la capsaicina activaba la AMPK en las células HepG2 al aumentar la fosforilación de la AMPK y su sustrato directo ACC. Por otro lado, determinamos que la activación de AMPK inducida por capsaicina, se producía a través de la proteína quinasa de la quinasa dependiente de calcio/calmodulina tipo β (CaMKKβ) ya que su activación con el inhibidor de CaMKK STO-609 o silenciando la proteína con siRNA. Además, la capsaicina disminuyó la viabilidad celular en células HepG2, descubriendo que AMPK está involucrada en este efecto de muerte producido por la capsaicina.

dianas 8(1) > Martínez-Martínez etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a12

Resveratrol sensibiliza las células de cáncer de próstata a la acción del Cisplatino y promueve apoptosis a través de la inducción de la fosfatasa DUSP1.

Desirée Martínez-Martínez, Altea Soto, Beatriz Gallego, Antonio Chiloeches, Marina Lasa

Instituto de Investigaciones Biomédicas Alberto Sols, CSIC-UAM.

a. desireemartinezmartinez@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A1, Cáncer.

Palabras clave: apoptosis; cisplatino; DUSP1; cáncer de próstata; resveratrol

Resumen

Resveratrol es un polifenol con propiedades antitumorales frente al cáncer de próstata, sin embargo, el mecanismo que subyace a sus efectos no ha sido completamente elucidado. Dado que previamente hemos demostrado que la fosfatasa DUSP1 induce apoptosis en células de cáncer de próstata, en este estudio, hemos querido analizar el papel de esta fosfatasa en los efectos de Resveratrol. Además, hemos analizado la eficacia del tratamiento combinado de Resveratrol con el agente quimioterápico Cisplatino sobre la viabilidad celular y la apoptosis, así como su relación con DUSP1 en células de cáncer de próstata. Nuestros resultados muestran que Resveratrol induce la expresión de DUSP1 en células de cáncer de próstata y que esta fosfatasa está implicada en la inhibición de la vía de NF-κB y de la expresión de Cox-2 mediada por el polifenol. Además, DUSP1 media la apoptosis inducida por Resveratrol, aunque no está involucrada en el arresto del ciclo celular que provoca dicho compuesto. Por último, nuestros datos demuestran que Resveratrol coopera con el agente quimioterápico Cisplatino en la regulación positiva de los niveles de DUSP1 y en la promoción de apoptosis, sugiriendo que esta fosfatasa juega un papel determinante en la sensibilización celular a la apoptosis inducida por Cisplatino. Estos resultados revelan un nuevo mecanismo mediante el cual Resveratrol induce apoptosis en células de cáncer de próstata, y resaltan la importancia de DUSP1 en nuevos enfoques terapéuticos basados en el uso de la combinación del polifenol y el cisplatino.

dianas 8(1) > Sánchez-Baltasar etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a11

Generación de modelos animales de tumores de mama deficientes en Rasa1.

Raquel Sánchez-Baltasar, Angustias Page, Isabel Ojeda-Pérez, Claudia Gil-Pitarch, Manuel Navarro, Ángel Ramírez

CIEMAT-Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre.

a. raquel.sanchez@externos.ciemat.es

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España
Sesión A1, Cáncer.

Palabras clave: Cáncer de mama, Rasa1, Tpr53, CRISPR/Cas9

Resumen

El cáncer de mama es el tipo de tumor que ocupa el primer puesto en incidencia en la población femenina mundial y es uno de los que mayor mortalidad causa. A pesar de que es frecuente encontrar mutaciones en los genes clásicos de la familia de Ras en otros tipos tumorales, no lo es en cáncer de mama, aunque la vía se encuentra frecuentemente sobreactivada en algunos subtipos como los triple negativos o basales. Estudios previos en nuestro laboratorio sugieren que esto puede deberse a la pérdida alélica de RASA1 en concomitancia con mutaciones en el gen TP53, eventos frecuentes en estos subtipos tumorales que son los más agresivos y de peor pronóstico. Por ello, hemos decidido llevar a cabo un estudio en profundidad de los mecanismos moleculares que llevan al desarrollo y/o progresión del cáncer de mama como consecuencia de la alteración de estos dos genes. En consecuencia, se planteó la generación de modelos animales deficientes en Rasa1 en combinación con mutaciones en Trp53 con el objetivo de confirmar la colaboración de la activación de la vía de Ras y p53 como causante de cáncer de mama. Para el desarrollo de estos modelos animales modificados genéticamente se empleó la tecnología CRISPR/Cas9. Para ello, se diseñó una pareja de guías específicas para el gen Rasa1 con el objetivo de utilizarlas mediante dos aproximaciones diferentes. En primer lugar, con el objetivo futuro de realizar el aloinjerto de células de glándula mamaria electroporadas con las guías diseñadas para Rasa1 (e infectadas con un vector lentiviral para la sobreexpresión de una forma mutada de p53), se realizó una puesta a punto extrayendo y purificando estas células de hembras donadoras e infectándolas con un vector lentiviral que expresa la proteína GFP para trasplantarlas en la almohadilla grasa desepitelizada de hembras receptoras. Por otro lado, se empleó la tecnología CRISPR/Cas9 para realizar la edición del gen Rasa1 en estadio embrionario. Las guías específicas para este gen se introdujeron en los zigotos junto con la Cas9 en forma de ribononucleoproteína mediante electroporación por dos métodos: iGonad (“Oviductal Nucleic Acids Delivery”) o ZEN (“Zygote Electroporation of Nucleases”). En el modelo de aloinjerto se observó una reconstitución del epitelio de la glándula mamaria con las células trasplantadas a 2 meses post-trasplante, verificando la utilidad de esta aproximación para la generación de nuestro modelo. Respecto a la electroporación de los zigotos, aunque con el método iGonad no se vio edición en ninguno de los casos, con el método ZEN se consiguió un 75% de edición, donde en más del 80% de estos animales se observó un cambio de expresión de la proteína RASA1. En conclusión, tanto la aproximación del aloinjerto en la glándula mamaria como la utilización del método ZEN para la generación de modelos animales modificados genéticamente con la tecnología CRISPR/Cas9 para el gen Rasa1, pueden ser una buena aproximación para el estudio de la implicación de este gen en el cáncer de mama.

dianas 8(1) > Peña-Asensio y Larrubia

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a34

El tratamiento prolongado de la hepatitis B crónica eAg(-) con análogos de nucleós(t)idos junto a un nivel bajo de AgHBs se asocia a una respuesta CD8 VHB específica no agotada.

Julia Peña-Asensio, Juan Ramón Larrubia

Hospital Universitario de Guadalajara.

a. hlnd.julia@gmail.com  b. juan.larrubia@uah.es

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A3, Mixta.

Palabras clave: Hepatitis virales; HBV; Inmunología; Inmunoterapia;

Resumen

Introducción y objetivos: La respuesta CD8 VHB específica está agotada durante la hepatitis crónica B eAg negativo (HCBe(-)). El tratamiento con análogos de nucleós(t)idos (AN) controla la replicación del VHB pero debe administrarse de forma indefinida. Sin embargo, la recuperación de una respuesta celular citotóxica VHB-específica no exhausta podría permitir la cura funcional y la suspensión del tratamiento. En este estudio, se comparó la respuesta CD8 VHB específica en pacientes con HCBe(-) tratados con AN en función de la duración del tratamiento y el nivel de HBsAg. Métodos: Se reclutaron un total de 37 pacientes HLA-A2+ con HCBe(-): 25 casos tratados durante menos de 6.5 años(<6.5a) y 12 pacientes durante más de ese tiempo (>6.5a). Se determinaron los niveles séricos de antígeno HBs (HBsAg). Mediante citometría de flujo, se visualizaron las células CD8 de sangre periférica específicas contra el epítopo HBV-Core18-27, utilizando co-tinción con complejos pentámericos, anti-CD3 y anti-CD8 (CD8+/Pent+). En las células CD8+/Pent+, se analizó: fenotipo PD-1/CD127; producción de interferón-gamma (IFNg); movilización de CD107a; capacidad de proliferación antígeno específica. Resultados: El nivel de HBsAg se correlacionó de forma negativa con la duración del tratamiento (r=-0.333; p=0.044) y fue mayor en el grupo <6.5a (3.36log UI; Rango intercuartil (RIQ) 1.2) que en el >6.5a (2.7log UI; RIQ 2.9), (p=0.023). La frecuencia de células CD8+/Pent+ sobre el total de células CD8 fue mayor en el grupo >6.5a (0.9%; RIQ 0.08) que en el grupo<6.5a (0.006%; RIQ 0.02) (p=0.001). En el grupo >6.5a se detectaron células CD8+/Pent+ en el 100% de los casos mientras que esto solo ocurrió en el 20% del grupo <6.5a (p=0.001). ). Además, en el grupo >6.5a, el nivel de HBsAg se correlacionó de manera negativa con la frecuencia de células CD8+/Pent+ (r=-0.786; p=0.036). La duración del tratamiento >6.5a y el nivel HBsAg<3.2log UI se correlacionó de manera positiva con la capacidad proliferativa de las células CD8+/Pent+ (r=0.668; p<0.001). La capacidad de degranulación de las células CD8+/Pent+ se correlacionó de manera positiva con la duración del tratamiento >6.5a y un nivel HBsAg<3.2log UI (r=0.794; p=0.006). Globalmente, el grupo >6.5a presentó una expresión de CD107a mayor (277 intensidad media de fluorescencia (IMF); RIQ 278) que el grupo <6.5a (IMF 166; RIQ 84), (p<0.05). La secreción de IFNg fue más alta en el grupo >6.5a con HBSAg<3.2log UI (111 IMF; RIQ 174) con respecto al resto de grupos (IMF 48; RIQ 52), (p<0.05). En ambos grupos del estudio las células CD8+/Pent+ expresaban un fenotipo PD-1/CD127 positivo. Conclusión: Un tratamiento con NUC superior a 6.5 años asociado a un nivel inferior a 3.2log UI de HBsAg se asocia a la presencia de una población CD8 VHB específica PD-1+/CD127+ con capacidades efectoras restauradas que podrían impactar en el desarrollo de una cura funcional.

dianas 8(1) > Errazquin etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a33

Generación de herramientas de utilidad preclínica para el estudio del cáncer oral en pacientes con anemia de Fanconi.

Ricardo Errazquin, Carmen Segrelles, Ramón García-Escudero

CIEMAT-Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre.

a. ricardo.errazquinciudad@externos.ciemat.es

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A3, Mixta.

Palabras clave: Anemia de Fanconi; FANCA; Carcinoma escamoso de cabeza y cuello; CRISPR/Cas9;

Resumen

La anemia de Fanconi (AF) es una enfermedad rara, genética recesiva, producida por mutaciones en genes de la ruta de Fanconi, implicada en reparación de ADN. La AF se caracteriza por fallo en médula ósea, malformaciones y alta incidencia de carcinomas escamosos de cabeza y cuello (CECyC). El CECyC en pacientes AF tiene mal pronóstico, y los tratamientos convencionales (quimio/radioterapia) presentan una elevada toxicidad en estos pacientes. El principal objetivo de este trabajo es generar herramientas de utilidad preclínica para obtener tratamientos efectivos y de baja toxicidad. Hemos observado que la línea de CECyC VU1365 derivada de un paciente AF con mutación en FANCA (el gen más frecuentemente alterado en AF), aunque no presenta diferencias en proliferación respecto a una versión corregida (VU1365+FANCA), si tiene una mayor capacidad de migración y una mayor sensibilidad a tratamiento con agentes genotóxicos (mitomicina-C y cisplatino). Estas diferencias pueden estar asociadas a distintos perfiles de expresión génica global, lo que permitiría la predicción de terapias efectivas mediante herramientas in silico. Por otro lado, se ha utilizado la tecnología CRISPR/Cas9 para introducir mutaciones inactivantes en FANCA en la línea celular Cal27, derivada de un CECyC de un paciente sin AF. Hemos obtenido exitosamente clones editados de Cal27 que no expresan proteína FANCA. Este resultado facilita la generación de nuevas líneas celulares de CECyC editadas para el análisis fenotípico y de expresión génica.

dianas 8(1) > Miguélez

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a32

Aproximación al estudio de las alteraciones moleculares responsables del desarrollo del cáncer de próstata resistente a la castración.

Laura Miguélez

lmiguelez.uah@gmail.com

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A3, Mixta.

Resumen

El cáncer de próstata (CP) es el segundo cáncer más frecuente en los hombres a nivel mundial. La mayoría de los tumores de próstata son dependientes de andrógenos, por lo que el principal tratamiento es la deprivación androgénica. El RA es un factor de transcripción que regula la expresión de genes implicados en la diferenciación de la próstata y en la progresión del ciclo celular. La respuesta al bloqueo hormonal es limitada y con el tiempo en un gran número de casos el tumor progresa a un fenotipo mucho más agresivo denominado CP resistente a la castración (CPRC). Entre los mecanismos moleculares implicados en este proceso está la expresión de variantes de splicing del RA (ARV7) que carecen del dominio de unión a ligando y que inducen un perfil de expresión diferente al del RA. Esto puede ser debido a que ambos interaccionan con diferentes proteínas como mecanismo para regular la expresión génica. Otro mecanismo implicado en el CRPC es la fosforilación y activación del RA por vías de transducción de señales alternativas. En este sentido, en CP se produce una disminución de la expresión de la tirosina fosfatasa SHP-1, una de las responsables de la regulación de estas vías de señalización. Por ello, el objetivo de este trabajo fue identificar las proteínas que interaccionan con SHP-1, AR y ARV7 en células de CP sensible y resistente al tratamiento hormonal. La comparación de las proteínas que interaccionan con RA, ARV7 ayudará a identificar las proteínas responsables del diferente perfil de expresión regulado por ambos receptores y las que interaccionan con SHP-1 a entender los mecanismos por lo que se activa el RA en ausencia de ligando. Para ello, hemos puesto a punto un sistema que permite identificar interacciones proteína-proteína in vivo, denominado BioID. Este método consiste en generar una proteína de fusión formada por nuestra proteína de interés y una biotina ligasa promiscua (BirA) que biotinila proteínas por proximidad. Estas construcciones las hemos generado en un vector de expresión y se han transfectado en células de CP sensibles y resistentes a los tratamientos hormonales. En una siguiente fase, se identificarán mediante espectrometría de masas las proteínas biotiniladas que son candidatas a interaccionar con nuestra proteína de interés. Los resultados obtenidos nos permitirán definir los mecanismos moleculares responsables del progreso del CP a la fase resistente al bloqueo hormonal e identificar nuevas dianas terapéuticas para esta fase del CP.

dianas 8(1) > Tosat-Bitrián etal

dianas | Vol 8 Num 1 | marzo 2019 | e201903a31

Specific biosensors in drug discovery for Amyotrophic Lateral Sclerosis.

Carlota Tosat-Bitrián, Ana Martínez, Valle Palomo

Centro de Investigaciones Biológicas, CSIC.

a. carlota.tosat@cib.csic.es

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A3, Mixta..

Palabras clave: quantum dots; ELA; patología molecular; célula única; TDP-43;

Resumen

Las enfermedades neurodegenerativas constituyen un problema crítico tanto médico, social como económico en todo el mundo. A pesar de los esfuerzos por comprender mejor las enfermedades neurodegenerativas, hay una falta de conocimiento sobre su patología molecular la cual es crucial para desarrollar nuevos tratamientos efectivos. La esclerosis lateral amiotrófica (ELA) es una enfermedad neurodegenerativa caracterizada por la muerte de las motoneuronas (MN) lo cual produce una parálisis progresiva. El mecanismo subyacente a dicha muerte selectiva de las motoneuronas todavía no se ha caracterizado, convirtiéndose en una diana crucial para el desarrollo de fármacos innovadores y efectivos. La técnica de perfil molecular es una tecnología innovadora y potente para estudiar y comprender las rutas y vías de señalización que subyacen los procesos tanto patológicos como fisiológicos. Como herramienta para aplicar esta tecnología, se propone la utilización de los quantum dots (QDs). Los QD son nanopartículas formadas por un núcleo de CdSe y una cubierta de ZnS que ofrecen propiedades fotoluminiscentes únicas. Presentan una alta fotoestabilidad, altos coeficientes de extinción, amplios espectros de absorción pero estrechos de emisión lo cual permite una detección más sensible así como ensayos multiplex. Los QDs han sido conjugados eficientemente con anticuerpos monoclonales (mAB) formando sondas QD-AB que pueden utilizarse en técnicas de inmunofluroescencia implementando un inmunoensayo multiplex basado en QDs. Aplicando esta tecnología, diferentes dianas clave de la ELA como TDP-43, p-TDP-43 y CK1 pueden ser analizadas a nivel de célula única en modelos humanos como linfoblastos y células madre pluripotenciales inducidas de pacientes de ELA El propósito científico de este proyecto es contribuir aún más a comprender la patología molecular de la ELA, encontrando patrones moleculares en los pacientes, detectando así las dianas moleculares de estas enfermedades; y estudiar los cambios moleculares que se producen en las proteínas diana clave tras tratamiento farmacológico ayudando a seleccionar posibles candidatos terapéuticos.