dianas 13(1) > Mora etal

dianas | Vol 13 Num 1 | marzo 2024 | e202403x034

Determinación de perfiles metabolómicos relacionados con el pronóstico y recidiva en tumores diferenciados de tiroides.

David Mora, Jose L Guerrero, Andrea D Hernández^a, Lizeth Leon, Jose M Palacios, Juliana Ramirez, Andres A Alvarez, Andrés Felipe Patiño-Aldana, Gabriela Lopez, Margarita Garcia, Harold H Mena, Mónica P Cala, Alejandro Ondo-Mendez

Grupo de Investigación Clínica de la Universidad del Rosario Colombia y Centro de Metabolómica- Metcore de la Universidad de los Andes Colombia.

a. pilarher13@gmail.com

IX Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2024.
XVIII Simposio de Dianas Terapéuticas.
18 a 22 de marzo, 2024. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: Differentiated thyroid cancer; Recurrence risk; metabolomics; prognosis

Resumen

El cáncer diferenciado de tiroides (CDT) se caracteriza por su heterogeneidad biológica y variabilidad en los resultados clínicos. Esta es la neoplasia endocrina maligna más común y constituye el 1-2% de todos los cánceres, con una alta variabilidad del riesgo de recurrencia según las características patológicas y clínicas, sin embargo, las herramientas de clasificación diagnóstica aún son invasivas y tardías. Este estudio propone explorar los perfiles metabolómicos relacionados con el desarrollo, pronóstico y recurrencia del CDT mediante el uso de análisis metabolómicos no dirigidos en tejidos tumorales.
Con el fin de explorar las vías metabólicas involucradas en el pronóstico y el riesgo de recurrencia, aplicamos cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS) en tejido tumoral con diferentes pronósticos (bajo, moderado, alto) según el riesgo de recurrencia según the American Thyroid Association Classification (ATA) (baja, moderada, alta) (n = 29). Evidenciado mediante análisis discriminante de mínimos cuadrados parciales (PLS-DA), 62 metabolitos candidatos, de los cuales 23 están significativamente alterados en el modelo que compara riesgo alto con riesgo moderado (FDR < 0,05 Benjamini-Hochberg). Entre los cuales se encuentran Aminoácidos, Ácidos carboxílicos, Ácidos grasos, Hidroxiácidos, Cetoácidos, Ácidos fosfóricos orgánicos, compuestos organoxigenados, Purinas y Piridinas, metabolitos que ayudan a establecer diferencias entre los distintos riesgos de recurrencia y otro tipo de características clínicas. La metabolómica representa una herramienta prometedora para la identificación de pacientes con alto riesgo de recurrencia en pacientes con CDT deficientes en terapia adyuvante posquirúrgica.

dianas 13(1) > Guerrero-Amelín etal

dianas | Vol 13 Num 1 | marzo 2024 | e202403x030

Estudio de la resensibilización de células colorrectales resistentes a inhibidores de PLK1 mediante el silenciamiento de la DNA polimerasa theta.

Carolina Guerrero-Amelín, Yuliia Fatych, Laura del Puerto-Nevado, Pedro Antonio Mateos-Gómez

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular. Departamento de Biología de Sistemas. Universidad de Alcalá.

a. carolina.guerreroa@uah.es  b. yuliia.fatych@uah.es

IX Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2024.
XVIII Simposio de Dianas Terapéuticas.
18 a 22 de marzo, 2024. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: polimerasa theta; silenciamiento; inhibidor; resistencia

Resumen

El cáncer colorrectal es el tercer tipo de cáncer con más incidencia a nivel mundial y el segundo con mayor mortalidad. Generalmente, comienza como grupos pequeños de células llamados pólipos que se forman en el interior del colon. Aunque la mayoría son benignos, algunos pueden convertirse en tipos de cáncer de colon con el tiempo. Si se desarrolla cáncer de colon, existen varios tratamientos disponibles, como la cirugía, la radioterapia, la quimioterapia y la inmunoterapia. Una de las estrategias empleadas contra este tipo de cáncer es el uso de inhibidores de PLK1, una quinasa implicada en la regulación del ciclo celular y de la reparación del DNA mediante recombinación homóloga. Los inhibidores de la Polo-like kinase 1, como el BI2536 se han probado en ensayos clínicos, pero la rápida adquisición de resistencia ha hecho que no se lleguen a implantar como una opción de tratamiento. Nuestro objetivo es estudiar si tanto las células que son sensibles como resistentes a este inhibidor reducen su viabilidad sin la actividad de la DNA Polimerasa Theta (PolQ), la cual está implicada en la reparación del DNA en un mecanismo que compite con la recombinación homóloga. PolQ está sobreexpresada en células tumorales, donde contrarresta el estrés replicativo y la inestabilidad genómica. Las células HCT116 sensibles y resistentes al BI2536 fueron sembradas en placas multi well. Se infectaron con lentivirus PLKO.1_shControl y PLKO.1_shPolQ para el silenciamiento de PolQ, y después fueron seleccionadas con puromicina. A continuación, se procedió al contaje y la siembra de ambas líneas para la realización de ensayos de viabilidad celular (MTT) y ensayos de formación de colonias. La expresión de RNA mensajero de PolQ se cuantificó en ambas líneas celulares, sensibles y resistentes al BI2536, obteniéndose una expresión del 14 y 11% respectivamente. En ambos ensayos, la línea resistente siempre se cultivó en presencia del BI2536. La línea sensible recibió la dosis IC50 del BI2536 3 días previos al ensayo del MTT. El silenciamiento de PolQ disminuyó la capacidad proliferativa de las células de la línea de cáncer de colon HCT116, independientemente de que éstas fueran o no resistentes al inhibidor de PLK1. Aunque las células resistentes a BI2536 no se resensibilizaron a este inhibidor mediante el silenciamiento de PolQ, el tratamiento combinado con BI2536 y el silenciamiento de PolQ de células HCT116 sensibles condujo a una reducción de la proliferación celular mayor que con cada uno de los tratamientos por separado.

dianas 13(1) > Echegaray-García etal

dianas | Vol 13 Num 1 | marzo 2024 | e202403x028

Efecto combinado de tratamientos antiandrogénicos con fármacos epigenéticos en cáncer de próstata.

David Echegaray García, Santiago Ropero Salinas, Begoña Colás Escudero

Universidad de Alcalá.

a. david.echegaray.uah@gmail.com; david.echegaray@edu.uah.es

IX Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2024.
XVIII Simposio de Dianas Terapéuticas.
18 a 22 de marzo, 2024. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: cáncer de próstata; CRPC; receptor de andrógenos; apalutamida; SP2905; RNAseq

Resumen

El cáncer de próstata es uno de los carcinomas más comunes en la población masculina, siendo una de las principales causas de mortalidad de esta. El desarrollo fisiológico y patológico de la próstata está controlado por andrógenos, de manera que entre las principales terapias encontramos tratamientos antiandrogénicos. La capacidad de los tumores de generar resistencia contra estos tratamientos desemboca en la aparición de una fase muy agresiva denominada cáncer de próstata resistente a la castración (CRPC). Por esa razón es muy necesario la mejora de las terapias ya existentes, así como el descubrimiento de otras nuevas, dado que actualmente solo existen tratamientos paliativos para esta fase. Además, en los últimos años se ha puesto de manifiesto la importancia de la epigenética en el desarrollo y progresión de diversas patologías, entre ellas el cáncer. Por tanto, el objetivo de este trabajo es comprobar si el tratamiento combinado de un fármaco antiandrogénico con un fármaco epigenético es capaz de mejorar la sensibilidad al primero. Para ello realizamos ensayos de viabilidad del fármaco antiandrogénico apalutamida y el fármaco epigenético SP2905 de manera individual y conjunta. Los resultados demuestran que, mientras que solo el modelo sensible LNCaP responde al tratamiento con apalutamida, tanto el modelo sensible como los modelos de CRPC Abl y 22Rv1 responden al tratamiento con SP2905. Cuando se tratan de manera conjunta, en todos los casos se consigue mejorar significativamente la sensibilidad a la apalutamida. Además, también pudimos comprobar que la interacción farmacológica responsable de este efecto es la sinergia mediante el método Chou-Talalay. Por último, también se quiso comprobar su efecto en la expresión génica, de manera que muestras de RNA se mandaron para realizar la técnica de secuenciación RNAseq. Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto que la mayoría de los cambios en la expresión génica con estos fármacos se dan en LNCaP. Sin embargo, el tratamiento conjunto aumenta estos cambios en los modelos de CRPC. Por tanto, es necesario determinar qué serie de genes podrían estar implicados en los cambios de sensibilidad observados en el tratamiento conjunto para así identificar posibles nuevas dianas terapéuticas que permitan desarrollar terapias más eficaces contra esta fase de la patología tan agresiva.