Dianas 4(1) > García-González y Jiménez-Alfaro

Dianas | Vol 4 Num 1 | septiembre 2015 | e20150912

Gestión de la colección de compuestos químicos y su contribución al descubrimiento temprano de fármacos.

Ana García González^1, 2, a, Lola Jiménez-Alfaro²

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. R&D GSK Tres Cantos.

a. ana.garcia.gonzalez.89@gmail.com

Palabras clave: colección de compuestos químicos; DMSO; optimización de leads; placa de ensayo; tecnología automátizada y robótica

Resumen

Una de las tareas fundamentales de la Investigación en una empresa farmacéutica es el descubrimiento de nuevos fármacos en enfermedades no cubiertas. GSK ha adoptado un proceso secuencial en el descubrimiento temprano de fármacos conocido como Cribado Molecular de alto rendimiento; esto supone enfrentar la colección de compuestos químicos de la compañía a una diana previamente identificada y validada, y realizar cientos de miles de ensayos bioquímicos y farmacológicos, para identificar moléculas activas frente a esa diana. Los compuestos químicos de la colección de GSK son, por tanto, una parte crítica en este proceso; sin una gestión adecuada de los mismos, que garantice su inventario, estabilidad y manipulación, no obtendríamos resultados de calidad en el proceso. La colección de GSK está compuesta por más de 3 millones de compuestos químicos, los cuales están almacenados en un sistema automatizado y refrigerado que permite conservar su estabilidad y posterior manipulación mediante tecnología automatizada y robótica. Entre ellas, un sistema de pipeteo con tecnología acústica que permite dispensar volúmenes muy pequeños de muestra prolongado la vida útil de los mismos. Así mismo, GSK ha adoptado por la implantación de un nuevo software que gestione el almacenamiento, manejo y distribución de la colección de compuestos de GSK y garantice un proceso robusto, reproducible y de alta calidad en la generación de placas de ensayo en todas y cada una de las etapas del descubrimiento temprano de fármacos

Dianas 4(1) > Cuadros-Núñez y Gómez-López

Dianas | Vol 4 Num 1 | septiembre 2015 | e20150905

Dried Blood Spot (DBS): Desarrollo de un método válido para evaluar cinética de voriconazol in vitro e in vivo.

Macarena Cuadros Núñez, Alicia Gómez López

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Servicio de Micología, Centro Nacional de Microbiología (CNM).  3. Instituto de Salud Carlos III, Majadahonda, 28220, Madrid, España.

a. macunu4@hotmail.com  b. aliciagl@isciii.es

Resumen

Voriconazol (VRC) es un triazol sintético de segunda generación recomendado como agente de primera línea en el tratamiento de la aspergilosis invasora, una de las infecciones fúngicas más frecuentes en pacientes inmunodeprimidos. Dado las especiales características farmacocinéticas y su estrecho margen terapéutico los expertos recomiendan monitorizar la exposición (concentraciones plasmáticas) en el paciente de una forma sistemática. Una de las metodologías más utilizadas para el seguimiento rutinario de la exposición de un fármaco en muestras clínicas es la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). El parámetro por excelencia que mejor refleja la cantidad total de fármaco (exposición) en un organismo vivo es el Área Bajo la Curva (ABC, o AUC), y en consecuencia éste constituiría el parámetro de mayor validez para predecir respuesta terapéutica. El ABC es una función de la concentración sanguínea frente al tiempo y para su evaluación son necesarios varios tiempos de muestreo, que implicarían extracciones continuas y frecuentes en un tipo de pacientes, los que sufren enfermedades fúngicas invasivas, inestables y complicados. Como alternativa a la clásica venopunción la posibilidad de utilizar la técnica Dried Blood Spot (DBS) para la monitorización de voriconazol puede aportar interesantes ventajas y permitir evaluar la exposición en cada paciente de forma individualizada. El proyecto realizado ha permitido establecer una metodología válida para cuantificar voriconazol a partir de una gota seca procedente de una matriz de suero comercial. Además, se ha iniciado el proceso de validación “in vivo” de la técnica desarrollada utilizando un modelo experimental de invertebrado, larvas de Galleria mellonella, a las que se administra una dosis única de voriconazol y se evalúa el comportamiento cinético de este azol mediante la técnica convencional de monitorización de concentraciones y la técnica DBS. Los resultados obtenidos demuestran que la técnica desarrollada es válida y reproducible para estudiar la exposición a voriconazol.

Dianas 4(1) > Chaves-Arquero etal

Dianas | Vol 4 Num 1 | septiembre 2015 | e20150904

Estudio de la interacción entre cuádruplex teloméricos y ligandos implicados en cáncer por SPR.

Belén Chaves Arquero, Clara M. Santiveri, Ramón Campos Olivas

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Unidad de espectroscopía y RMN, Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO), Melchor Fernández Almagro 3, 28029, Madrid, España.

a. chavesarquerobelen@gmail.com

Resumen

Los telómeros son considerados dianas terapéuticas ya que el mantenimiento de su secuencia por parte de la telomerasa es lo que caracteriza la inmortalidad de las células cancerígenas. Inicialmente, las estrategias terapéuticas se basaban en la telomerasa. En cambio, actualmente se están desarrollando estrategias centradas en los componentes que forman el telómero (shelterinas), como la proteína TRF1. Ensayos in vivo han demostrado que moléculas pequeñas consideradas como inhibidores de TRF1, deslocalizan a esta shelterina de su posición en el telómero, y esto bloquea el crecimiento de las células madre cancerígenas. Este proyecto pretende ir más allá, e intenta conocer el mecanismo de acción de estos compuestos, que podrían interaccionar con el ADN telomérico. Para estudiar la interacción, previamente caracterizamos las estructuras adquiridas por el ADN telomérico (G4-cuádruplex) mediante dicroísmo circular (DC) y espectroscopía de UV. En paralelo, verificamos por resonancia magnética nuclear (RMN) la solubilidad y estructura de los compuestos cuyo mecanismo de acción se investiga. Finalmente, determinamos la especificidad de unión y la afinidad de estos compuestos por el ADN telomérico utilizando resonancia de plasmones superficiales (SPR).

Dianas 3(1) > Giménez-Mascarell y Peel

Dianas | Vol 3 Num 1 | septiembre 2014 | e20140914

Biomarcadores en la práctica clínica. Validación y verificación.

Paula Giménez Mascarell, Charles Peel

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Myriad Genetics Iberia. Alcobendas, Madrid, España.

a. pgmascarell@gmail.com

Palabras clave: biomarcador; test genético; medicina personalizada; HER2; ER; Endopredict

Resumen

La gran cantidad de información derivada de las nuevas técnicas de biología molecular como la secuenciación masiva, ha proporcionado una nueva generación de biomarcadores moleculares los cuales están adquiriendo cada vez una mayor importancia en el ámbito de la medicina personalizada, con aplicaciones que incluyen el diagnóstico, el pronóstico y selección de terapias. El diagnostico molecular permite identificar los genes involucrados en el desarrollo de una patología, y por tanto individualizar el tratamiento en función de las características genéticas de los pacientes, lo que implica una terapia más efectiva. Sin embargo, antes de lanzar al mercado productos basados en el uso de biomarcadores, hay toda una labor de validación y verificación necesaria para garantizar la veracidad de los resultados obtenidos. En este trabajo se va a realizar un metaanálisis del procedimiento de validación de biomarcadores en función del tipo de test que se desee diseñar, apoyado en un ejemplo concreto de validación del test Endopredict el cual mide el riesgo de recurrencia a largo plazo en pacientes con cáncer de mama ER-positivos/HER-2 negativos.

Dianas 3(1) > García-Redondo etal

Dianas | Vol 3 Num 1 | septiembre 2014 | e20140913

Producción de extractos alergénicos de Dermatophagoides pteronyssinus utilizando medios de cultivo de origen vegetal para su utilización en el diagnóstico y tratamiento de la enfermedad alérgica.

Ana María García Redondo, Alejandro Martín Palacios, David Rodríguez Gil

Dianas 3(1) > Maganto-Burgos y Coello-Molinero

Dianas | Vol 3 Num 1 | septiembre 2014 | e20140912

Búsqueda, aislamiento e identificación de nuevos compuestos con actividad antitumoral procedentes de un organismo marino del género Capnella.

Elena Maganto Burgos, Laura Coello Molinero

Dianas 3(1) > Calvo-Alfonso etal

Dianas | Vol 3 Num 1 | septiembre 2014 | e20140911

Caracterización de modelos hepáticos 2D y 3D.

Susana Calvo Alfonso, Carolina Rodenas-Valverde, Jesús de la Fuente-Carralero

Dianas 3(1) > Arranz-Nicolás y Sanz-Fraile

Dianas | Vol 3 Num 1 | septiembre 2014 | e20140910

Empleo de ensayos de High Throughput Screening (HTS) aplicado al estudio de canales iónicos y otras dianas terapéuticas.

Javier Arranz Nicolás, Ana Isabel Sanz Fraile

Dianas 3(1) > Esteban-Rubio y Molina-Guijarro

Dianas | Vol 3 Num 1 | septiembre 2014 | e20140908

Elisidepsin es un compuesto antitumoral de origen marino que causa muerte celular por necrosis relacionada con el contenido lipídico de las líneas celulares tumorales.

Susana Esteban Rubio, José Manuel Molina Guijarro

Dianas 3(1) > Froilán-Muñoz etal

Dianas | Vol 3 Num 1 | septiembre 2014 | e20140907

Optimización y caracterización del proceso de polimerización de Dermatophagoides pteronyssinus modificado químicamente con glutaraldehído.

Silvia Froilán Muñoz, Fernando Pineda de la Losa, David Rodríguez Gil